Taller espectrofotometria


Taller: Espectrofotometría
Análisis Instrumental - Tecnología Médica 2015

Nombres: ______________________________________________________________________________

1.- Transforme los siguientes valores:
Transmitancia (t)
Transmitancia (%T)
Absorbancia
0.255
25.5
0.59
0.567
56.7
0.24
0.001
1.0
2
0.001
1.0
2
1.0
100
0
0.1
10
1.0
0.79
79.4
0.100
0.0867
8.67
1.061

2.- Defina que es laabsortividad molar
R: Se refiere a la cantidad de luz absorbida por una disolución. Y se define como unidad de absorbancia, por unidad de concentración, por unidad de longitud de la trayectoria de luz. Se expresa en mol/L

3.- Determine la concentración de una solución de vainillina que presentó una absorbancia de 0,13 a la longitud de onda correspondiente al máximo de absorción. Siendo el valor de laabsortividad molar a dicha longitud de onda 1,19 x 104 L/mol*cm y utilizando cubetas de 1,5 cm de paso óptico







4.- Determine las concentraciones de las siguientes muestras problemas, considerando los valores entregados en la tabla:
Solución
Concentración del analito
Absorbancia
Estándar 1
1 mg/100mL
0.17
Estándar 2
5 mg/100mL
0.51
Estándar 3
10 mg/100mL
1.03
Estándar 4
20 mg/100mL
1.92Blanco de reactivo
0
0.05
Muestra 1
8.867
0.92
Duplicado muestra 1

0.95
Muestra 2
5.160
0.45
Duplicado muestra 2

0.68
Muestra 3
20.29
2.08
Duplicado muestra 3

2.07
Muestra 4 diluida 1:10
146.79
1.54
Duplicado muestra 4 diluida 1:10

1.49

5.- ¿Qué consideraciones debe realizar para los cálculos de: a) muestra 1, b) muestra 2, c) muestra 3, d) muestra 4?
R:
1) Para la muestra 1 primero se deberestar la absorbancia del Blanco de Reactivo a la muestra y al duplicado. Paso seguido promediar ambas absorbancias y el total multiplicarlo por el factor de Calibración para encontrar la concentración. Este procedimiento se realiza para la muestra 1, 2,3.
2) Para la muestra número 4 se debe restar la absorbancia del Blanco de reactivo a ambas, luego multiplicar esos valores por el Fc. de dilución quecorresponde a x10 , paso seguido promediarlas y multiplicar el valor por el Factor de Calibración
















Un espectrofotómetro es un instrumento que nos permite medir la luz que transmite una solución a través de una celda o cubeta contenedora de ésta. Los componentes de un espectrofotómetro son:

Conteste las siguientes preguntas acerca de los espectrofotómetros y sus componentes
1.-¿En qué casos es útil una lámpara de tungsteno o wolframio, y una de deuterio e hidrógeno? (Tarea: Cuál es la ventaja de las lámparas de aleación tugnsteno/halógeno?)
Tipo de lámpara
Uso
Tungsteno

Deuterio e hidrógeno


2.- ¿Cuál es la función del monocromador, y por qué es fundamental para la determinación cuantitativa de un analíto?
R: El monocromador cumple una función vital dentro de todas laspartes de un espectrofotómetro, ya que este permite separar la luz en sus distintas longitudes de onda y escoger una longitud de onda específica para el análisis, existen como prismas o rejillas de difracción, pero en ambos casos cumplen la misma función. Es importante para que la ley de beer se cumpla que la monocromaticidad de la luz sea efectiva.
3.- Defina “ancho de banda espectral”
R: elancho de banda espectral hace relación a la pureza de la longitud de onda seleccionada.
Y corresponde al intervalo de longitudes de onda comprendidas entre los puntos en donde la transmitancia alcanza la mitad de su máximo de transmisión o bien el intervalo de longitudes de onda que contiene el 75% de la energía radiante que proviene del monocromador.





4.- ¿Cuál es la diferencia entre un filtroy un monocromador?
R: el filtro no es más que un rotor que posee una serie de vidrios coloreados a los cuales se les ha asignado una longitud de onda específica.
El monocromador tiene la particularidad de separar la luz policromatica en luz monocromática y se conocen de dos tipos. Como prismas y rejillas de difracción.

5.- Indique la diferencia entre los monocromadores de prisma y los de...