Taller Reactivos Qcos Ext ADN

REACTIVOS USADOS PARA LA EXTRACCION DE ACIDOS NUCLEICOS

Reactivo
Característica*
Función*
Tris-HCl
amortiguador
Mantiene el pH en la solución.
Evita que se degrade el DNA y el RNA en lascélulas.
EDTA
Agente quelante
Atrapa iones de Mg+ Mn+ Ca+, estabilizando el ADN e inhibiendo la actividad de las ADNsas.
NaCl
Sal
5M evita la contaminación del ADN con polisacáridos y solubiliza el ADNKCl
sal
Mantiene la fuerza iónica de la solución
Acetato de potasio
Sal
Precipita las proteínas
Fenol
Solvente orgánico
Desnaturaliza activamente las proteínas y suprime su solubilidadCloroformo
Solvente orgánico
Desnaturaliza las proteínas, elimina lípidos y el otros solventes orgánicos que estén en la solución
SDS
Detergente aniónico
Solubiliza proteínas, tejidos y membranas, evita queel ADN quede atrapado en restos celulares
Sarkosil
Detergente
Más estable que el SDS solubiliza proteínas
CTAB
Surfactante catiónico
Solubiliza polisacáridos
Triton X-100
Detergente no iónicoSolubiliza proteínas
Beta-Mercaptoetanol
Antioxidante biológico
Reduce los puentes disulfuro
Elimina algunas ribonucleasas durante la lisis de RNA
DTT (ditioeritol)
Agente reductor
1M,reducecuantitativamente enlaces disulfuro y mantiene monotioles en un estado reducido
Isopropanol
Alcohol
Precipita el ADN en algunos casos puede eliminar polisacáridos

RNasa
Enzima
Degrada del ARN
DNasaEnzima
Degrada el ADN
Tiocianato de guanidinio
Agente caotropico
Degrada proteínas
Lisozima
Enzima
Lisa células resistentes a la acción de detergentes
Líticasa
enzima
Lisa células de levadurasBrEt
Agente intercalante (cancerígeno)
Intercala entre las bases de ADN y produce fluorescencia
CsCl
Gradiente de concentración
Purificación del ADN
Acetato EDTA
Tampón
Mantiene la fuerza iónica parala precipitación del ADN con isopropanol
Etanol absoluto al 95%
Alcohol
Usado para precipitar ácidos nucleicos después de desproteinizar
Cloroformo isoamilico

Solventes orgánicos
Cloroformo...