tarea

Las integrinas ocupadas por ligandos traducen senales que llevan a la activacion de las kinasas de la familia src resultando en diseminacion celular.

El rol de la talin en este proceso ha sido testeado mediante el analisis de adhesion en lavados control y tln1 – plaquetas a firbrinogeno bajo condiciones estaticas.
Las plaquetas de raton en contraste con las humanas, no se dispersan bien enfibrinogeno inmobilizado sin activacion celular.
Los experimentos fueron llevados a cabo en presencia de 0,01 U/ml de trombina. Una adhesion similar se observo en el lavado control y en el tln1-plaquetas a matriz de fibrinogeno, confirmando la observacion previa de que la activacion de AlfaIIbbeta3 no es necesaria para la adhesion estatica de las plaquetas al fribrinogeno.
Sin embargo, aunque lasplaquetas control rapidamente formaran lamellipodia y se propagaran en un lapso de 10 a 15 minutos, tln1 plaquetas solo formaron filopodia con ocasionales y transitorias lamellipodias y no se propagaron por hasta 45 minutos.
Por lo tanto, talin1 es requerida para la alfaIIbbeta3 senalizacion externa dependiente.
Estos resultados difieren de las observaciones hechas con plaquetas que expresanuna union a talin deficiente a beta3 integrina mutante (L746A) que se propaga en fibrinogeno en presencia de antagonistas. Una posible explicacion para esta discrepancia es que la mutacion beta3(L746A) solo interrumpe parcialmente la interaccion entre beta3 y talin.

LA formacion patologica de trombos in vivo fue determinada mediante microscopia intravital de arteriolas mesentericas heridas demedula osea quimerica tln1 de ratones.
Para esto, las plaquetas fueron marcadas con marcadores fluorescentes in vivo y la herida fue inducida por la aplicacion topica de 20% FeCl3.
En ratones control, las plaquetas interactuaron rapidamente con las paredes celulares heridas y fueron adheridas firmemente 5 minutos luego de provocada la herida, luego de lo cual plaquetas adicionales fueronreclutadas de la circulacion resultando en la formacion de agregados (plaquetarios) y oclusion venosa completa en todos los ratones antes de los 20 minutos (tiempo medio de occlusion, 15,3+- 2.0 min.
En contraste, en tln1 las plaquetas de raton solo se adhirieron transitoriamente al sitio de herida , no hubo formacion de trombos y el flujo sanguineo se mantuvo durante el periodo de observacion en todaslas venas analizadas. Por lo tanto, talin es esencial para la adhesion plaquetaria en la pared venosa herida (injuriada), proceso mediado por la accion conjunta de integrinas beta1 y beta3.
Los mecanismos moleculares intimos que regulan la activacion de las integrinas han sido estudiados intensivamente durante las ultimas dos decadas. Un resultado central de estos estudios ha sido la propuesta deque la proteina citoesqueletica talin podria ser el regulador central de este proceso. Nuestro estudio provee indudable evidencia in vivo del rol unico y esencial de talin en la activacion de las integrinas alfaIIbbeta3 y alfa2beta1 en los mamiferos.
Esto no fue acertado a pesar de los recientes reportes mostrando que mutaciones en residuos criticos en el sitio de union de la talin con las colasde las integrinas beta1 y beta3 respectivamente, interrumpen la activacion de las integrinas y conducen a severos eventos y defectos hemostaticos in vivo. Las colas de las integrinas beta se adhieren a un largo numero de proteinas de adhesion, y por lo tanto fue imposible clarificar si las mutaciones afectan solo la talin o tambien a otras proteinas adicionales que se adhieren a la cola deintegrina y que contribuyen a su activacion.
Interesantemente, Mx-cre perdida inducida de talin1 no afecto significativamente el conteo periferico de plaquetas.
Debido a que talin2, que es muy similar a talin1, no es expresada en cantidades significativas en celulas hematopoyeticas, nuestros hallazgos sugieren que talin es indispensable para la maduracion de megacariocitos, formacion de pro...