Tareas Tema 1

1.-Fundamento y finalidad del método de fraccionamiento celular

El fraccionamiento subcelular es un conjunto de métodos y técnicas que tienen como objetivo obtener fracciones puras o enriquecidas en un determinado componente celular, ya sea éste un orgánulo (mitocondrias, núcleos, peroxisomas, etc.) una fracción de membrana (membrana total, plasmática, dominio basolateral, dominio apical,etc.), complejos multiproteicos (citoesqueleto de actina, microtúbulos, poros nucleares, etc.).
Fases:
• Preanalítica: Obtención preparación preliminar de la muestra hasta llegar al laboratorio.
• Analítica: o de aplicación de procedimientos. Toma y tratamiento de datos, recogida de resultados en un informe.
• Post-analítica: Validación técnica del informe analítico
Todo proceso defraccionamiento subcelular tiene dos etapas:
• Ruptura de las células o tejidos para obtener un lisado celular (o tisular) en el que la fracción deseada se encuentre en condiciones adecuadas para su purificación.
• Separación de la fracción deseada del resto de componentes de la célula o del tejido mediante algún criterio como puede ser una diferencia de densidad (centrifugación en gradientes ocentrifugación diferencial), la presencia de algún antígeno (cromatografía de inmunoafinidad, inmunoprecipitación, etc.).
2.-.fundamento y finalidad del método de autorradiografía

La autorradiografía es un método gracias al cual se puede localizar la situación concreta del material radiactivo, dentro de un tejido concreto, dentro de una célula, de una parte de una célula o, incluso, dentro deuna molécula.
En esta técnica, una muestra que contiene una sustancia radioactiva se coloca en contacto directo con una gruesa capa de una emulsión fotográfica, preparada para la autorradiografía. Los átomos radiactivos que contiene la muestra se desintegran y la radiación emitida activa los granos individuales de haluro de plata de la emulsión y los hace susceptible de convertirse en platametálica, por medio de un revelado fotográfico. Después del procesado químico, el patrón de granos resultante indica la distribución del material radiactivo dentro de la muestra. La observación tiene lugar mediante el microscopio.
La imagen da dos tipos de información: la localización del material radiactivos con respecto a al objeto, o a sus partes, y su intensidad, que está relacionada con lacantidad de material radiactivo presente en la muestra.

3.-Fundamento y finalidad del método de cultivo celular
Termino utilizado para denominar el crecimiento de células in vitro, incluyendo el cultivo de células aisladas.
En los cultivos celulares, las células no están organizadas en verdaderos tejidos.
El cultivo de células es esencial para el estudio de múltiples aspectos delcomportamiento celular fuera de las influencias y variaciones sistémicas de los organismos animales. A parte del papel fundamental que el cultivo de células y tejidos tiene en el avance del conocimiento de la biología celular y molecular, su dominio es fundamental en la biotecnología. El cultivo de células es un método eficaz para la obtención de productos con gran interés terapéutico, como los anticuerposmonoclonales, las vacunas virales o ciertos fármacos antitumorales.

Las principales ventajas que ofrece el cultivo de tejidos son:
- El control del medio en el que se encuentran las células, tanto el medio físicoquímico (pH, temperatura, presión parcial de oxígeno...) como fisiológico (presencia de suero, hormonas, factores de crecimiento...).
- Caracterización y homogeneidad de lascélulas. En los tejidos se encuentran varios tipos celulares, estos se pueden aislar y cultivar independientemente.
- Gran expansión del número de células. Resulta útil cuando se trata de obtener algún producto con interés farmacológico.
- Cuando se trata de analizar el efecto de diferentes sustancias en un proceso celular, el cultivo permite una interacción directa del producto y la...