Tecnica analítica polifenoles para ACAI

DETERMINACIÓN CUANTITATIVA DE POLIFENOLES
MÉTODO: Espectrofotometría Ultra Violeta.
REACTIVOS:
Carbonato de sodio (75 g/L)
Folin Ciocalteu
Metanol al 80 %
Agua Purificada
Preparación deEstándar y Curva de Calibración: (Nota.- Proteger de la luz)
Solución estándar: Pesar con exactitud aproximadamente 5,0 mg de estándar (+) catequina, llevar a fiola de 10 mL, disolver y diluir con aguapurificada.
Curva de Calibración:
Concentración 0,05 mg/mL: Tomar una alícuota de 1 mL de la solución estándar, llevar a fiola de 10 mL y diluir a volumen con agua purificada.
Concentración 0,1 mg/mL:Tomar una alícuota de 2 mL de la solución estándar, llevar a fiola de 10 mL y diluir a volumen con agua purificada.
Concentración 0,15 mg/mL: Tomar una alícuota de 3 mL de la solución estándar,llevar a fiola de 10 mL y diluir a volumen con agua purificada.
Concentración 0,2 mg/mL: Tomar una alícuota de 4 mL de la solución estándar, llevar a fiola de 10 mL y diluir a volumen con aguapurificada.
Para leer la curva de calibración seguir el siguiente Procedimiento:
Procedimiento: Medir 2 mL de cada una de las concentraciones de las soluciones estándar en cuatro tubos de ensayo diferentesluego añadir a cada uno 1 mL de reactivo folin-Ciocalteu y 5 mL de carbonato de sodio (75 g/L), homogenizar, dejar reaccionar durante 30 minutos y leer las cuatro concentraciones en unespectrofotómetro UV a una longitud de onda de 755 nm.
El blanco de la curva es utilizando 2 mL de agua purificada, 1 mL de reactivo folin-Ciocalteu y 5 mL de carbonato de sodio (75 g/L), homogenizar, dejarreaccionar durante 30 minutos y leer. (Nota.- Preparar el blanco mínimo 10 minutos antes de realizar la lectura.)
Preparación de la muestra: (Nota.- Proteger de la luz)
Solución muestra: Pesar con exactitudaproximadamente 5,0 g de muestra, llevar a fiola de 50 mL, añadir 30 mL de metanol al 80 %, sonnicar por 40 minutos (evitar que se caliente) y diluir a volumen con metanol al 80 % . Tomar una...