tecnica de cultivo de microorganismos


VI. DISCUSIÓNES

Se realizaron diversas técnicas de cultivo de microorganismos; en el ejercicio 1 primero utilizamos caldo nutritivo, agar nutritivo inclinado y agar nutritivo vertical como medios de cultivo con la finalidad de determinar las características de crecimiento de la bacteria Staphylococcus sp. En tales medios.
(García Martos, 1994) El caldo nutritivo favorece mucho eldesarrollo y multiplicación de las bacterias por que al difundirse estas por todo el medio encuentran con facilidad las sustancias que necesitan para nutrirse. Si aparece turbidez hay crecimiento.
(Negroni Marta.2005) El medio de cultivo; agar nutritivo, puede dejarse solidificar con el tubo inclinado para obtener una mayor superficie de siembra (“agar inclinado o pico de flauta o slant”) o dejarseenfriar con el tubo en posición vertical (“agar columna”). Los medios sólidos se utilizan para aislar e individualizar los distintos tipos de microorganismos presentes en una muestra.
Al someter a incubación los tubos a 37°C por 24 horas, ya se puede determinar las características de crecimiento de la bacteria; por ejemplo la forma de crecimiento sobre el agar inclinado es filiforme, sobre elcaldo nutritivo se dio la formación de una película y sobre el agar vertical el crecimiento es limitado a la línea de inoculación.
En el ejercicio 2 se utilizo las técnicas de cultivo de aislamiento y recuento de placas por el método estrías y diluciones. A partir de un cultivo mixto, se obtuvo un cultivo puro de bacterias, a través de la obtención de colonias aisladas. Cada colonia representa unapoblación de microorganismos procedentes de una sola célula, a partir de la cual se posee la seguridad de obtener dicho cultivo puro de un solo tipo de microorganismo.
(Gerard J. Tortora 2007) El método de siembra por estría en placa funciona bien cuando el microorganismo que se desea aislar esta presente en grandes cantidades en relación con la población total. En cambio, cuando elmicroorganismo que se desea aislar esta presente solo en cantidades muy pequeñas estas deben incrementarse mediante el empleo de un enriquecimiento selectivo antes de que se lo pueda aislar con el método de siembra por estría con placa.
El método de siembra por estría se hicieron en placas con agar Mac Conkey y agar manitol. segun Albert Pahissa Berga (2009) El medio selectivo mas empleado en loslaboratorios clínicos para aislar Staphylococcus aureus es el medio agar sal manitol (medio chapman), que por su elevado contenido en sal inhibe el crecimiento de la mayoría de las bacterias gramnegativas. Ademas, este medio permite realizar una identificación presuntiva basándose en la coloración amarilla característica que adquieren las colonias.
Agar MacConkey; Medio diferencial solido, en placa otubo, para el aislamiento e identificación de enterobacterias y otros bacilos entéricos gram - .Aveces se emplea caldo Mac Conkey. La interpretación se basa: colonias rosas = lactosa (+).
Tras la incubación, se observaron las colonias aisladas en alguna región de la placa inoculada. Con esta técnica se logro la separación de los microorganismos que se encontraban en un cultivo mixto. En laszonas donde existen colonias aisladas se puede estudiar la morfología colonial., de acuerdo a su tamaño, forma, color, textura, etc.

Al igual que en el método de aislamiento por estrías también se utilizo la misma mezcla de microorganismos (E. coli, Bacillus s.p., Staphylococcus s.p.) en el método de aislamiento por disolución. Según Pelczar et al., (1982). El método de dilución para el caso debacterias ofrece mayor sencillez y menor cantidad de contaminantes y es uno de las maneras más comunes en el aislamiento de este tipo de microorganismos.
En las 2 placas esterilizadas de laboratorio se observaron una gran diferencia de número de colonias. Las colonias aparecen sobre la superficie, distribuidas uniformemente. Podrán diferenciarse las colonias de acuerdo a su tamaño, forma, color,...