Tecnica de Eluido

BANCO DE SANGRE

Al banco llegan dos tipos de solicitudes o peticiones:

1.Solicitud de Transfusión: tiene un dorso de color rojo, es una petición del paciente.
En esta solicitud se presentan los estudios que se le pueden realizar al paciente a través de su muestra, como: El concentrado de hematíes, Grupo sanguíneo, Rh y escrutinio de Ac irregulares libres en el suero o coombs indirecto.2.Solicitud de estudio de Madres: Tiene un dorso de color azul, en esta solicitud se hacen estudios del grupo sanguineo de madre y del hijo, del Rh de la madre y el hijo, coombs Directo o escrutinio para estudiar anticuerpos libres en el suero.

TECNICA

ELUIDO DEL CORDÓN

Esta Técnica pretende determinar si existe una incompatibilidad del grupo ABO entre madre e hijo, es decir, se realizaen madres con grupo sanguíneo O, que han tenido un hijo de grupo sanguíneo A o B, porque el niño al ser del grupo A, tiene antígenos A en la membrana de sus hematíes y lo que puede ocurrir en este caso es que la madre al ser del grupo O, tiene anticuerpos anti-A y anti-B y puede haber pasado al niño a través del cordón fetal anticuerpos A que son incompatibles con los antígenos A de los hematíesdel niño, por lo que se produciría hemólisis y lo mismo ocurriría si el niño es del grupo sanguíneo B.
Este estudio sólo se realiza en estos casos y el niño también presenta en algunos casos ictericia que obliga a estudiar si es patológica o no, el niño siempre va a presentar ictericia patológica si se esta produciendo hemólisis en su torrente sanguíneo.
Este estudio no se realiza con madres ehijos del mismo grupo porque no hay ningún riesgo de incompatibilidad de grupo.
La gran mayoría de los pacientes con incompatibilidad por grupo clásico no sufre eritroblastosis fetal, cursando con una enfermedad más bien benigna, poco intensa donde la hemólisis fetal es escasa en importancia. Estudios recientes señalan que la razón de esta benignidad de la incompatibilidad ABO se debe a la pocaespecificidad de los antígenos ABO, los cuales a partir de la 6° semana de gestación se encuentran en la mayoría de los tejidos fetales, incluyendo los eritrocitos, además de en lugares como la placenta, donde se piensa hay gran cantidad de anticuerpos maternos.
MATERIAL
-Tubos de plástico para lavados.
-Pipetas Pasteur.
-Centrifuga 3500rpm
-Suero salino.
-tubo de cristal.
-Parafilm-congelador -40ºC
-Baño 37ºC
-Hemantigenos comerciales A, B Y O
-Tarjeta de Coombs
-Incubadora
Muestra
Eluido de la sangre del cordon.

PROCEDIMIENTO
1. Lavado de hematíes: A partir del tubo que nos llega con la sangre del cordón fetal, extraemos de el con una pipeta pasteur 4-5 gotas y lo echamos en un tubo de plástico de 10 ml, y lo diluimos con suero salino ¼, introducimos el tubo a lacentrifuga y al salir quedara el sobrenadante de suero y el botón de sangre al fondo, decantamos el suero, quedando el tubo y volvemos a repetir el lavado con suero salino 5 veces, de esta forma eliminamos cualquier otra sustancia que pueda interferir como lípidos, proteínas y eliminamos también la gelatina de Wharton que puede interferir en los resultados, ya con el ultimo lavado, decantamos el suerosalino no todo y cogeremos 4 gotas de suero salino y 3 gotas de sedimento o botón de sangre ya limpia, esto lo echamos en un tubo de vidrio.

2. Congelado de muestra: La muestra la llevamos al congelador, de esta manera eluimos la muestra, es decir, “despegamos” separamos los anticuerpos de la madre unidos a los hematíes del niño para poder estudiar dichos anticuerpos, sabemos que esosanticuerpos son de la madre ya que el ser humano no crea anticuerpos hasta los 3-4 meses de vida, por eso congelamos la muestra alrededor de 20-30 minutos.

3. Descongelamos: Pasado el tiempo sacamos la muestra en la que ya no existen hematíes del niño porque se han roto en la congelación, quedando solamente presente en la muestra los anticuerpos de la madre A y B, llevamos la muetra al baño de 37ºC...