Tecnica histologica

Técnica histológica
Dr. Gabriel Magariños Definición La técnica histológica es una serie secuencial de pasos a través de los cuales una muestra de tejido llega a transformarse en delgados cortes coloreados capaces de ser observados al microscopio. Sinopsis general Paso Obtención Objetivos Medios usuales

- Proveer el material para su - B i o p s i a estudio al microscopio - Resecciónquirúrgica - Autopsia - Preservar el material - Evitar la autólisis - Eliminar los microorganismos - Formol al 10 % - Bouin - Glutaraldehído

Fijación

Inclusión

- Embeber el material en un medio - Parafina fácil de cortar en fetas muy - Acrílicos delgadas - Resinas Epoxi - Lograr láminas muy delgadas que - Micrótomo rotatorio sean atravesadas por la luz - M. de deslizamiento - Ultramicrótomo -Visualizar los tejidos - Hematoxilina - e o s i n a - Identificar moléculas en ellos - Tricrómicos (Histoquímica) - Histoquímica - Preservar el corte, manteniéndolo - Bálsamo del C a n a d á aislado del aire y deshidratado - Medios plásticos

Corte

Coloración

Montaje

Pasos de la técnica histológica Obtención Consiste en la provisión del material que se desea estudiar por medio delmicroscopio. El método seleccionado debe ser el adecuado para cada tipo de material. En todos los casos el instrumental con el cual se seccionan los tejidos debe estar muy afilado para evitar aplastar sus elementos, así como se debe evitar cualquier otro tipo de maltrato en su manipulación. Los principales métodos empleados son: la biopsia, la resección quirúrgica y la autopsia.

- La biopsia consiste enla extracción de pequeños fragmentos de tejido de un organismo vivo. Este procedimiento puede ser realizado de muy diversas formas, consideraremos algunas: - biopsia incisional : se realiza seccionando con instrumentos cortantes como el bisturí. - biopsia por punch : el punch es un instrumento filoso con forma de sacabocados que se utiliza para tomar biopsias de piel. - biopsia por punción : serealiza con agujas de biopsia y recientemente también con agujas del tipo intramuscular (microbiopsia). - biopsia endoscópica: se hace a través de endoscopios, que son instrumentos flexibles que permiten la observación de algunas cavidades internas del organismo. - La resección quirúrgica consiste en la extirpación de órganos completos o de grandes partes de los mismos, a través de un procedimientoquirúrgico. - La autopsia o necropsia es el examen de los órganos luego de la muerte, generalmente con el objetivo de determinar las causas de la misma. Cualquiera sea el procedimiento empleado para la obtención, el material que resulta del mismo debe ser inmediatamente fijado o congelado para evitar los procesos de autodestrucción de las células conocidos como autólisis. Fijación La fijación esen esencia un método para la preservación de la morfología y la composición química de las células y los tejidos. Consiste en producir la muerte de las células, de manera tal que las estructuras que poseían éstas en el estado viviente se conserven con un mínimo de modificaciones, a lo largo del tiempo y de los subsiguientes pasos de la técnica. Asimismo algunos métodos tratan de conservar intactasu composición química. La fijación debe realizarse inmediatamente de extraer las células del organismo, para evitar las lesiones agónicas ocasionadas por la anoxia, que inicialmente producen cambios osmóticos y luego alteraciones estructurales y bioquímicas más profundas, fenómenos conocidos en conjunto como autólisis. Por el mismo motivo los fijadores deben actuar sobre fragmentos relativamentepequeños de tejidos (como regla general menos de 1 cm cúbico), para que la difusión del fijador desde las superficies hasta la parte central del bloque tisular se haga en un tiempo reducido. Propiedades de los fijadores: - Producen una rápida muerte celular, evitando la autólisis - Preservan la morfología celular y tisular - Preservan la composición química - Penetran a los tejidos con relativa...