Tecnica Histologica

Práctica II. Técnica Histológica
I.Introducción.
INMUNOHISTOQUIMICA
Las técnicas de inmunohistoquímica son uno de los mayores avances de la biología celular y de la histología.
Fundamentos:
Sise inyecta una proteína extraña u otro antígeno en un animal se producen anticuerpos.
Un anticuerpo es una proteína producida por determinadas células sanguíneas que se une con la sustancia extrañaque estimula su producción y por lo general la precipita. En el laboratorio se pueden purificar y conjugar los anticuerpos (es decir, unir por enlaces químicos) con un colorante fluorescente(fluorocromo) como la fluoresceína. Entonces se aplica este reactivo a cortes de tejido fijados o congelados sobre portaobjetos, con el fin de localizar el antígeno en las células y los tejidos. Después seexamina con MO de fluorescencia. También puede utilizarse la unión a una enzima y su detección por histoquímica enzimática. Dentro del grupo de marcadores los fluorocromos son los más sensibles. Sualtísima sensibilidad permite detectarlos en concentraciones tan bajas como una molécula. Por lo tanto si el antígeno que deseamos detectar se encuentra en nuestro tejido en bajas concentraciones, elanticuerpo que utilicemos también se unirá a él en bajas concentraciones. Gracias al uso de fluorocromos igual detectaremos la presencia del antígeno. Los preparados realizados con esta técnica disminuyen sufluorescencia con el tiempo, por lo tanto, los resultados deben ser fotografiados inmediatamente.
Pueden utilizarse varios anticuerpos a la vez en un mismo preparado, utilizando diferentesmarcadores de los mismos.
Es junto a las lectinas la técnica más específica. Debido a que en general los antígenos son proteínas, su estructura puede alterarse durante los pasos de la técnica histológica. Porlo tanto en general los tejidos se procesan mediante congelación y cortes con crióstato. Aunque la técnica de parafina en algunos casos no los altera.
HISTOQUIMICA ENZIMATICA.
Esta técnica...