Tecnicas Biologia Molecular
Páginas: 2 (410 palabras)
Publicado: 11 de abril de 2011
Guía Técnicas de Biología Molecular
Obtención de DNA.
Se pueden obtener por muestras de mucosa. Se utiliza un liquido llamado buffer de lisis para romper la celular , la utilización deproteasas es para romper los enlaces pepiticos entre aminoácidos y eliminan también las DNA asas , la insolubilización del DNA consiste en agregar liquido salino para su neutralización , después laprecipitación se lleva acabo por el alcohol frio ayuda a la separación del DNA de las demás moléculas
Obtención de RNA.
La homogenización se lleva acabo gracias a agentes caotropicos que son capaces dedesnaturalizar las nucleasas y eliminar carbohidratos y lípidos. Su separación se lleva acabo por centrifugación y lisis celular por cloroformo.
Evaluación del RNA obtenido.
Se puede dar porespectrofotometría que es la análisis del RNA concentrado por un rayo de luz UV , el rango de pureza aceptado es entre 1.8-2.0.Y la otra es la electroforesis en la que se usa un gel de agarosa donde lasmezclas de DNA de diferentes tamaños se hacen migrar a través del gel durante cierto tiempo y se obtiene una separación en el que la distancia es inversamente proporcional a su longitud en pares debases .La migración se lleva acabo por el manejo de corrientes eléctricas las moléculas negativas(DNA) migran al polo positivo y las moléculas positivas migran al polo negativo. Los geles son al 1 o2% donde en el 1% migran con mas facilidad las moléculas pues el poro del gel es más abierto.
Espectrofotometría.
La espectrofotometría es aquella en la cual podemos obtener las concentracionesde DNA a partir de espectros de luz ABSORBIDOS ,la mas importante es la de luz ultravioleta visible que usa radiación y para medir el espectro absorbido y tener una análisis cualitativo de lassustancia se utiliza la ley general de la espectrofotometría .
P.C.R. Reacción en cadena de polimerasa
El Dr. Kary Mullis desarrollo esta técnica para la síntesis de secuencias de DNA a partir...
Obtención de DNA.
Se pueden obtener por muestras de mucosa. Se utiliza un liquido llamado buffer de lisis para romper la celular , la utilización deproteasas es para romper los enlaces pepiticos entre aminoácidos y eliminan también las DNA asas , la insolubilización del DNA consiste en agregar liquido salino para su neutralización , después laprecipitación se lleva acabo por el alcohol frio ayuda a la separación del DNA de las demás moléculas
Obtención de RNA.
La homogenización se lleva acabo gracias a agentes caotropicos que son capaces dedesnaturalizar las nucleasas y eliminar carbohidratos y lípidos. Su separación se lleva acabo por centrifugación y lisis celular por cloroformo.
Evaluación del RNA obtenido.
Se puede dar porespectrofotometría que es la análisis del RNA concentrado por un rayo de luz UV , el rango de pureza aceptado es entre 1.8-2.0.Y la otra es la electroforesis en la que se usa un gel de agarosa donde lasmezclas de DNA de diferentes tamaños se hacen migrar a través del gel durante cierto tiempo y se obtiene una separación en el que la distancia es inversamente proporcional a su longitud en pares debases .La migración se lleva acabo por el manejo de corrientes eléctricas las moléculas negativas(DNA) migran al polo positivo y las moléculas positivas migran al polo negativo. Los geles son al 1 o2% donde en el 1% migran con mas facilidad las moléculas pues el poro del gel es más abierto.
Espectrofotometría.
La espectrofotometría es aquella en la cual podemos obtener las concentracionesde DNA a partir de espectros de luz ABSORBIDOS ,la mas importante es la de luz ultravioleta visible que usa radiación y para medir el espectro absorbido y tener una análisis cualitativo de lassustancia se utiliza la ley general de la espectrofotometría .
P.C.R. Reacción en cadena de polimerasa
El Dr. Kary Mullis desarrollo esta técnica para la síntesis de secuencias de DNA a partir...
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