tecnicas cromatografias

TÉCNICAS CROMATOGRÁFICAS
PRINCIPIOS DE LA CROMATOGRAFÍA
1.- DEFINICIÓN
cromatografía es un método físico de separación para la caracterización de mezclas
complejas. Es un conjunto de técnicas basadas en el principio de retención selectiva,
cuyo objetivo es separar los distintos componentes de una mezcla, permitiendo
identificar y determinar las cantidades de dichos componentes.

Keulemansha definido la cromatografía como un método físico de separación
en el cual los componentes a separar se distribuyen entre dos fases, una de las
cuales constituye la fase estacionaria, de gran área superficial, y la otra es un
fluido (fase móvil) que pasa a través o a lo largo de la fase estacionaria.
La fase estacionaria puede ser un sólido o un líquido dispuesto sobre un sólido
que actúacomo soporte, de gran área superficial. La fase móvil es un fluido
(puede ser gas, líquido o fluido supercrítico) que se usa como portador de la
mezcla.
En la cromatografía ocurren dos fenómenos muy importantes y que son
prácticamente los rectores del proceso de separación: la adsorción y la
absorción.
La adsorción es la retención de una especie química en los sitios activos de la
superficiede un sólido, quedando delimitado el fenómeno a la superficie que
separa las fases o superficie interfacial.
Esta retención superficial puede ser física o química. La adsorción depende de
la naturaleza de la substancia adsorbida, de la temperatura, de la naturaleza y
estado de subdivisión del adsorbente, y de la concentración.
La absorción es la retención de una especie química por parte deuna masa y
depende de la tendencia que tiene ésta a formar mezcla o reaccionar
químicamente con la misma.

2.- HISTÓRIA
Aunque procesos parecidos ocurren en la naturaleza cuando disoluciones pasan
a través de arcilla, rocas, etc... la cromatografía como tal adquiere importancia
cuando en 1850 el químico F.F.Runge, que trabajaba con tintas, descubrió que
los cationes orgánicos se separabanpor migración cuando se depositaba una
disolución que los contenía sobre un material poroso, como papel.
En 1906 el botánico ruso Tswett utilizó la cromatografía en columna para
separar extractos vegetales coloreados, y a este proceso le dió el nombre de
cromatografía. Pero el mayor desarrollo se produce en 1930 con Lederer
cuando consigue separar los colorantes de la yema de huevo.Posteriormente
los químicos Khun, Kamer y Ruzucca desarrollan la cromatografía en el campo
de la química orgánica e inorgánica, y obtienen el premio Nobel por sus
trabajos en 1937, 1938, 1939 respectivamente.
A partir de 1940 los métodos cromatográficos adquieren extensión mundial de
forma que en 1940 Tiselius divide los métodos cromatográficos en
cromatografía por análisis frontal, desarrollo porelución y desarrollo por
desplazamiento, obtuvo el premio Nobel por sus trabajos en 1948.
Al mismo tiempo la cromatografía se aplicaba en el campo de la bioquímica, y
así Martin consigue separar algunos aminoácidos acetilados.

CLASIFICACIÓN DE LAS TÉCNICAS CROMATOGRÁFICAS

Tipos

Fase móvil

Fase estacionaria

Cromatografía en
papel

Líquido

Líquido ( moléculas de aguacontenidas en la
celulosa del papel )

Cromatografía en
capa fina

Líquido

Sólido

Cromatografía de
gases

Gas

Sólido o líquido

Cromatografía líquida
en fase inversa

Líquido
(polar)

Sólido o líquido
(menos polar)

Cromatografía líquida
en fase normal

Líquido
(menos
polar)

Sólido o líquido
(polar)

Cromatografía líquida
de intercambio iónico

Líquido
(polar)Sólido

Cromatografía líquida
de exclusión

Líquido

Sólido

Cromatografía líquida
de adsorción

Líquido

Sólido

Cromatografía de
fluidos supercríticos

Líquido

Sólido

1.- CROMATOGRAFÍA EN COLUMNA
Se utilizan columnas de vidrio rellenas de Alúmina (Al2O3), Sílica u Oxido de Magnesio.
La fase estacionaria esta constituida por un sólido poroso, el cual queda soportado...