Tecnicas de Biologia Molecular

Introducción
Los nuevos métodos para el análisis y
manipulación del ADN , ARN y las proteínas permiten
estudiar los genes y células en profundidad.
Estos métodos nos permiten:
 Descifrar la información genética
 Comprender como se relaciona esta información en
conjunto para formar células y posteriormente
organismos funcionales.
 Entender los procesos que ocurren en el interiorcelular, como estas unidades básicas responden a su
ambiente y se relacionan a las células vecinas.

Introducción
 Esta revolución, fue impulsada por el desarrollo de

métodos que han incrementado nuestra capacidad de
manipular el ADN.
 En 1970, se aisló por primera vez un fragmento de
ADN. Lo cual torno posible generar moléculas nuevas
de ADN en un tubo de ensayo y permitió laintroducción de este material genético en organismos
vivos (ADN recombinante, corte y

empalme
genética).

genético

o

ingeniería

Introducción
Con técnicas más
sofisticadas , los genes
rediseñados pueden:
 Insertarse en cualquier
organismo vivo.
 Son
funcionales
y
heredables
en
el
genoma del organismo
modificado.

Introducción
Se emplean para:
 Detectar mutaciones en elADN
que
explican
enfermedades
heredadas.
 Diagnosticar una predisposición
individual de las enfermedades
genéticas, como el cáncer.
 Para identificar o absolver a
posibles sospechosos de un crimen
 Producir
gran cantidad
de
fármacos.
 Desarrollar a gran escala enzimas
capaces de degradar partículas de
suciedad hasta petróleo.

Aislamiento de células
 La mayor parte deestos procedimientos bioquímicos

requieren grandes cantidades de células, que luego se
someten a una ruptura física para aislar sus
componentes.
 Es importante preservar el tipo celular individual, se
han desarrollado métodos para disociar las células de
los tejidos y separar las diferente variedades presentes.

Tipos de cultivo celular
CULTIVOS PRIMARIOS:
 Conservan la morfología delas células del órgano del que fueron aisladas
 Sus cromosomas tienen un número diploide (2n)
 Dentro de las desventajas está la de una mayor probabilidad de presentar virus
adventicios o latentes, lo que implica el desarrollo de la adecuada tecnología
para el control de calidad.

Tipos de cultivo celular
CULTIVOS EN SUSPENSION :
 Aunque el cultivo estacionario
es ideal cuando se buscala
elaboración
de
productos
extracelulares, el cultivo en
suspensión es deseable cuando
los productos son intracelulares
o
cuando
se
presentan
problemas con la capacidad de
anclaje de un determinado tipo
de célula.
 El proceso de cultivo continuo
ofrece factores económicos
decisivos
(utilización
de
mejores
equipos,
reducida
manipulación) cuando se trata
de producir cultivosa una
mayor escala de operación.

Tipos de cultivo celular
LINEAS CELULARES:
 Las Líneas Celulares continuas están formadas por células que se diferencian
genética y morfológicamente de las células de las cuales se originaron.
 Una transformación puede inducirse fisiológicamente (interacción celular,
polaridad) a través de hormonas como la hidrocortizona o utilizando
inductores nofisiológicos como el DMS.

Cultivo celular
Ventajas del cultivo celular:
 El control del medio fisicoquímico, como el pH,
temperatura, presión osmótica, tensión de oxígeno
(O2) y gas carbónico (CO2) de las células cultivadas
 El control de las condiciones fisiológicas, las cuales
deben ser constantes.
 Permiten el estudio del transporte y la utilización de
metabolitos.

Cultivocelular
Desventajas del cultivo celular
 Las técnicas de cultivo celular necesitan unas

asepsia

estrictas condiciones de

porque las células animales crecen menos rápido que la mayoría de los
contaminantes comunes como las bacterias, los mohos y las levaduras.
 Es necesario

agregar a los medios suplementos

como suero,
plasma y fluidos intersticiales, entre otros para de una...