Tecnicas de coagulasa y catalazas.

PRUEBA DE LA COAGULASA
Objetivo: Permite separar Staphilococcus aureus, que produce la enzima coagulasa, de las otras especies de estafilococos que se denominan coagulasa negativos.

Fundamento:Staphilococcus aureus posee dos tipos de coagulasa:
* Una endocoagulasa o coagulasa ligada o
"clumping factor" que está unida a la pared celular. Esta
actúa directamente sobre el fibrinógenoprovocando la
formación de coágulos cuando se mezcla una
suspensión bacteriana con plasma citratado u oxalatado, la velocidad de coagulacion es directamente proporcional a la concentración enzimatica.Técnica: varía según la coagulasa investigada.
- coagulasa ligada (en portaobjetos)
en una gota de solución fisiológica emulcionar una suspensión de Staphilococcus y agregarle una ansada de plasmacitratato mezclando suavemente.
- colagulasa ligada y libre: (en tubo)
colocar volumenes iguales de plasma citratado y de cultivo de caldo de staphilococccus (o ansa,una buena cantidad de coloniapura) mezclar suavemente e incubar durante 4hs a 37ºC controlando cada 30min, si se produce la coagulacion.
**Resultados: positivo: EN PORTA.Positivo: aglutinacion entre 20.30 seg (cepa staph.aureusvirulenta);
Dudoso: aglutinacion e/20 seg a 1 min(cepa staph.aureus virulenta.negativo:suspencion homogénea
.EN TUBO. positivo:coagulo total.parcial:cualquier grado de coagulacion.
negativo:suspencionhomogenea(staph epidermidis u otro organismo.

PRUEBA DE LA CATALASA: 
Fundamento: la enzima catalasa se encuentra en la mayor parte de las bacterias aerobias y anaerobias facultativas quecontienen citocromo (exepto el streptococcus) generalmente las bact que carecen de citocromo tambien carecen de catalasa, lo que les impide descomponer el peroxido de hidrogeno.
La catalasa descompone elperóxido de hidrógeno (H2O2) en agua y oxígeno bajo la fórmula 2 H2O2-->2 H2O + O2. De esta manera las bacterias se protegen del efecto tóxico del H2O2, que es un producto final del metabolismo...