Tecnicas De Separacion De Proteinas

TÉCNICAS DE SEPARACIÓN DE PROTEÍNAS
1. Métodos de separación basados en el tamaño molecular:
a. Diálisis y ultrafiltración
b. Gradiente de densidad
c. Cromatografía de exclusiónmolecular o filtración en gel
d. Electroforesis en gel de poliacrilamida
2. Métodos de separación basados en la carga eléctrica:
a. Cromatografía de intercambio iónico
b. Electroforesis3. Métodos de separación basados en la diferencia de la solubilidad:
a. Precipitación isoeléctrica
b. Fraccionamiento por solvente
4. Métodos de separación basados en la especificidad deligandos:
a. Cromatografía de afinidad.
A continuación se explicara brevemente algunas técnicas.
a. Cromatografía de exclusión molecular o filtración en gel. La cromatografía es una técnicaque permite la separación de moléculas diferentes, presentes en una misma muestra. El método está basado en la circulación de una fase móvil (que arrastra a la mezcla de compuestos a separar), através de una fase estacionaria. Dependiendo de la afinidad relativa que por ambas fases tengan los distintos compuestos presentes en la mezcla resultará su separación.
La cromatografía de exclusiónmolecular (a menudo también llamada filtración en gel o de tamiz molecular) es una de las técnicas más sencillas de las empleadas en la separación de proteínas y ácidos nucleicos. Este tipo decromatografía se realiza en columnas cilíndricas rellenas con algunos de los geles que se fabrican con este fín y que pueden ser de varios tipos
b. Cromatografía de intercambio iónico. La cromatografía deintercambio iónico separa las proteínas de acuerdo a su carga neta, la cual depende la composición de la fase móvil. Ajustando el pH o la concentración de iones de la fase móvil, varias moléculas deproteína pueden ser separadas.
c. Cromatografía de afinidad. Es una cromatografía que utiliza la alta especificidad de las reacciones biológicas del tipo antígeno-anticuerpo, hormona-receptor....