Tecnicas de serologia
Páginas: 34 (8482 palabras)
Publicado: 17 de marzo de 2011
TÉCNICA DE BENCIDINA O DE ADLER
FUNDAMENTO QUÍMICO
Las peroxidasas sanguíneas son catalasas que, como su nombre indica, poseen actividad catalítica (enzimática) en las reacciones de oxidación, ya que tienen la propiedad de descomponer el peróxido de hidrógeno u otros peróxidos orgánicos, produciendo liberación de radicales oxhidrilo según la siguiente reacción:
H2O2H – OH + O
El grupo hem de la hemoglobina posee esa actividad enzimática, que puede catalizar la ruptura del peróxido de hidrógeno. Mientras no estén presentes otras sustancias orgánicas oxidantes, esta actividad de la hemoglobina, descompone el peróxido de hidrógeno en agua y oxígeno, que al reaccionar con la bencidina la oxidarán formando un compuesto intensamente azul.
Laoxidación de la bencidina es utilizada como prueba presuntiva para la identificación de sangre. La técnica tiene una sensibilidad de 1,300, 000 a 500,000.
Un resultado negativo excluye la presencia de sangre; si la reacción es positiva requiere, como toda técnica de orientación, del empleo de reacciones de confirmación ya que se pueden obtener falsas reacciones
Positivas con otrassustancias que tengan actividad semejante a la de las peroxidasas o bien con otros materiales oxidantes:
|PLANTAS |PRODUCTOS BIOLÓGICOS |OTRAS SUSTANCIAS |
|Manzanas |Médula +osea |Herrumbe |
|Albaricoque|Leucocitos |Formol |
|Espárragos |Tejido cerebral |Estiércol |
|Frijol |Líquido espinal |Sulfato de cobre|
|Acelgas |Intestino |Dicromatos |
|Remolacha |Hígado |Permanganato de potasio |
|Zarzamora |Pulmón |Algunosblanqueadores |
|Alcachofa |Saliva | |
|Papa |Moco | |
|Nabo |Pus| |
PREPARACIÓN DEL REACTIVO:
a) Solución de bencidina:
0.25 g. de bencidina se disuelven en 175 ml. De etanol y se añaden 5 a 10 gotas de ácido acético glacial. Se guarda en un frasco gotero ámbar, en refrigeración en tanto no se usa.
b) H2O2 también en frasco gotero ámbar:
PROCEDIMIENTO:
Humedecer un hisopocon H2O destilada y frotarlo sobre la mancha problema.
Añadir al hisopo 1 ó 2 gotas de solución de bencidina, después de unos momentos de observar que no dé coloración con ésta, poner la misma cantidad de H2O sobre el hisopo.
En caso positivo aparecerá rápidamente una coloración azul.
DETERMINACION DE ACIDO URICO
MATERIAL BIOLOGICO
1ml de suero o plasma
FUNDAMENTOEl acido úrico en solución alcalina reduce el reactivo de acido fosfotungstico y forma un complejo de color azul cuyas intensidades es directamente proporcional a su concentración
REACTIVOS
Reactivo de acido fosfotungsnico 1 frasco con 230ml
Ca de sodio al 14% 1 Frasco Con 230ml
Patrón de acido úrico 1mg/ml frasco con 20 ml
Patrón de conservación 2 a 8 ºC
Reactivo de trabajo
Patrón de...
FUNDAMENTO QUÍMICO
Las peroxidasas sanguíneas son catalasas que, como su nombre indica, poseen actividad catalítica (enzimática) en las reacciones de oxidación, ya que tienen la propiedad de descomponer el peróxido de hidrógeno u otros peróxidos orgánicos, produciendo liberación de radicales oxhidrilo según la siguiente reacción:
H2O2H – OH + O
El grupo hem de la hemoglobina posee esa actividad enzimática, que puede catalizar la ruptura del peróxido de hidrógeno. Mientras no estén presentes otras sustancias orgánicas oxidantes, esta actividad de la hemoglobina, descompone el peróxido de hidrógeno en agua y oxígeno, que al reaccionar con la bencidina la oxidarán formando un compuesto intensamente azul.
Laoxidación de la bencidina es utilizada como prueba presuntiva para la identificación de sangre. La técnica tiene una sensibilidad de 1,300, 000 a 500,000.
Un resultado negativo excluye la presencia de sangre; si la reacción es positiva requiere, como toda técnica de orientación, del empleo de reacciones de confirmación ya que se pueden obtener falsas reacciones
Positivas con otrassustancias que tengan actividad semejante a la de las peroxidasas o bien con otros materiales oxidantes:
|PLANTAS |PRODUCTOS BIOLÓGICOS |OTRAS SUSTANCIAS |
|Manzanas |Médula +osea |Herrumbe |
|Albaricoque|Leucocitos |Formol |
|Espárragos |Tejido cerebral |Estiércol |
|Frijol |Líquido espinal |Sulfato de cobre|
|Acelgas |Intestino |Dicromatos |
|Remolacha |Hígado |Permanganato de potasio |
|Zarzamora |Pulmón |Algunosblanqueadores |
|Alcachofa |Saliva | |
|Papa |Moco | |
|Nabo |Pus| |
PREPARACIÓN DEL REACTIVO:
a) Solución de bencidina:
0.25 g. de bencidina se disuelven en 175 ml. De etanol y se añaden 5 a 10 gotas de ácido acético glacial. Se guarda en un frasco gotero ámbar, en refrigeración en tanto no se usa.
b) H2O2 también en frasco gotero ámbar:
PROCEDIMIENTO:
Humedecer un hisopocon H2O destilada y frotarlo sobre la mancha problema.
Añadir al hisopo 1 ó 2 gotas de solución de bencidina, después de unos momentos de observar que no dé coloración con ésta, poner la misma cantidad de H2O sobre el hisopo.
En caso positivo aparecerá rápidamente una coloración azul.
DETERMINACION DE ACIDO URICO
MATERIAL BIOLOGICO
1ml de suero o plasma
FUNDAMENTOEl acido úrico en solución alcalina reduce el reactivo de acido fosfotungstico y forma un complejo de color azul cuyas intensidades es directamente proporcional a su concentración
REACTIVOS
Reactivo de acido fosfotungsnico 1 frasco con 230ml
Ca de sodio al 14% 1 Frasco Con 230ml
Patrón de acido úrico 1mg/ml frasco con 20 ml
Patrón de conservación 2 a 8 ºC
Reactivo de trabajo
Patrón de...
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