Tecnicas de tincion

sTécnicas de tinción

Las células, siempre han tenido el problema de visibilidad, ya que el medio que los rodea no lo hace muy visible, para esto se utilizan colorantes, que permiten tener una mejor visibilidad de la celula.
El método de tinción consiste en teñir todas las células pero no todas del mismo modo, este procedimiento hace que las células se dividan en dos grupos grampositivas ygramnegativas.
El ingrediente activo de el procedimiento es el yodo, el yoduro de sodio hace que el yodo sea mas soluble con el agua.
El yodo entra en las células y forma un
complejo insoluble en agua con el cristal violeta. De nuevo tanto las células
grampositivas como las gramnegativas se encuentran en la misma situación. Se
lleva a cabo después de la decoloración, usando bien alcohol o bienacetona,
sustancias en las que es soluble el complejo yodo – cristal violeta. Algunos
organismos (grampositivos) no se decoloran mientras que otros (gramnegativos) lo
hacen. La diferencia esencial entre esos dos tipos de células está, por lo tanto, en la
resistencia a la decoloración. Después de la decoloración las células grampositivas
son todavía azules, pero las gramnegativas son incoloras.Para poner de manifiesto
las células gramnegativas se utiliza una coloración de contraste. Habitualmente es
un colorante de color rojo, como la safranina o la fucsina básica. Después de la
coloración de contraste las células gramnegativas son rojas mientras que las
grampositivas permanecen azules.
Figura 13: La tinción de Gram.
Deben destacarse dos aspectos cruciales de la tinción de Gram:1) El tratamiento con cristal violeta debe preceder al tratamiento de yodo. El
yodo por sí solo tiene poca afinidad con las células.
2) La decoloración debe realizarse con poco agua para evitar que pierdan la
tinción las células grampositivas. El proceso de decoloración debe ser corto y
es esencial un cálculo preciso del tiempo para obtener resultados
satisfactorios.
Finalmente, el carácterde grampositivo no es siempre un fenómeno del todo o
Nada . Algunos organismos son más grampositivos que otros y algunos son
gramvariables, es decir, unas veces grampositivos y otras gramnegativos. La
tinción de Gram es uno de los métodos de tinción más importantes en el laboratorio
bacteriológico.

Tinción ácido – alcohol resistencia
Esta tinción sirve principalmente para clasificarmicobacterias y actinomicetos, que
tienen un alto contenido en lípidos y en ácidos micólicos y que no pueden ser
calificadas por la tinción de Gram. Para empezar se hecha sobre el portaobjetos una
mezcla de fucsina – fenol, en la que la fucsina hace de colorante rosa y el fenol de
mordiente. Las células se tiñen de rosa, tanto las ácido – alcohol sensibles como las
resistentes. Después se usa undecolorante orgánico que hace que las bacterias
ácido – alcohol sensibles se decoloren mientras que las ácido – alcohol resistentes
se quedan rosa. Como en la tinción de Gram se utiliza un colorante de contraste
que en este caso es el azul de metileno que tiñe las células ácido – alcohol
sensibles de color azul quedando las células ácido – alcohol resistentes de color
rosa.

Tinción deesporas
Se utiliza para teñir las estructuras de resistencia llamadas endosporas bacterianas.
Sobre el portaobjetos con la preparación se echa verde malaquita que tiñe las
células de verde. Luego se lava con agua destilada con lo que las células se quedan
incoloras y las endosporas permanecen verde. Finalmente se usa la safranina para
obtener bacterias de color rosa mientras que las endosporascontinúan con su color
verde del verde malaquita.

Tinción negativa
Es el reverso del procedimiento de tinción usual: las células se dejan sin teñir pero
se colorea un cambio el medio que las rodea. Lo que se ve, por tanto, es el perfil de
las células. La sustancia utilizada para la tinción negativa es un material opaco que
no tiene afinidad por los constituyentes celulares y que simplemente...