Tecnicas his

TECNICAS HISTOLOGICAS
1._ MUESTRO
Se efectúa mediante biopsia, necropsia o autopsia.
·  Biopsia: consiste  en  tomar  un trozo de  tejido de  un ser vivo. Este  procedimiento de  uso frecuente  en medicina requiere  el mismo cuidado de asepsia, antisepsia, etc., que se utiliza en todo acto quirúrgico menor o mayor.
·  Necropsia: es el procedimiento en el cual se  extrae material de  un cadáver
·  Autopsia: consiste  en  el estudio analítico y sistemático completo. Macroscópico y microscópico de los órganos, aparatos y sistemas de un  cadáver. Se realiza para establecer causas de muerte. 
2._ FIJACION
Una  vez obtenido el material que se  desea estudiar  por cualquiera  de los procedimientos descriptos se  procede  a  su fijación con lo que  se  evita  la destrucción o lisiscelular. Es un proceso físico — químico complejo por el cual se mantiene  a  las estructuras orgánicas en el estado más parecido al que  poseían en vida. Puedes ser físicos, químicos, y de lavado
Los objetos de la fijación son:
· Mantener las estructuras en el estado más parecido al que poseían in vivo.
· Evitar la lisis celular y la proliferación bacteriana, Dar cierta  solidez o dureza  al tejidoo material. La  fijación detiene los procesos vitales pero en ciertas condiciones mantiene  las actividades de algunos componentes moleculares, por ejemplo la actividad  de algunas enzimas
3._ PROCESAMIENTO
Se realiza un lavado para eliminar el exceso de fijador, para hacer la inclusión sin interferencia por parte del fijador. Existen medios de inclusión que son hidrófobos y precisan de laeliminación de agua en la muestra.

Se realiza una deshidratación ya que una gran parte del tejido está constituido por agua, se aplica una serie gradual de soluciones acuosas de menor a mayor grado de agente deshidratante,
Tercero, se efectúa el aclaramiento o diafanización: se pasa a una solución de una sustancia que es miscible tanto con el alcohol como con el medio de inclusión autilizar. La sustancia comúnmente utilizada es el Xileno o Xilol. De la misma manera se coloca la muestra de tejido en un recipiente de Xilol, que solo es soluble en alcohol al 100%. Se llama aclaramiento ya que el tejido se torna transparente o claro en el xileno, esto se debe a que cambia su índice de refracción. También se pueden utilizar Tolueno, Benzol o Cloroformo como medios de aclaramiento. Elalcohol y el xileno disuelven los lípidos de la célula y por lo cual al extraerse también se extraen las grasas y los lípidos de la célula.

4._ INCLUSION EN PARAFINA
La parafina es una mezcla de hidrocarburos saturados que tienen diferentes puntos de fusión. Parafina blanda funde a 44 – 48ºC y la parafina dura a 56 – 58ºC.
La parafina se pone en estufa de cultivo a unos grados porencima de su punto de fusión. Se sumerge la muestra, se lleva a estufa unos minutos para que la  parafina penetre  en  los tejidos. Luego se enfría bruscamente  colocando el recipiente en hielo. 
5._ CORTE EN MICROTOMIA
Se realiza mediante  el uso del micrótomo. El micrótomo de  congelación permite cortar el tejido después de fijarlo por frío, congela con dióxido de carbono y lo endurece para que luegopueda ser cortado. Es un método rápido y por eso se usa para el diagnóstico de biopsias obtenidas en el acto quirúrgico para que el cirujano proceda según este informe. Se lo usa también para visualización de lípidos y es muy útil en el estudio de tejido nervioso Los micrótomos para corte incluidos en parafina son: el de deslizamiento, en el que la cuchilla es móvil y el tejido que se cortaestá fijos y el tipo Minot, en el que el tejido se moviliza y la cuchilla está fija. Los cortes pueden tener un espesor de 4 a 4 a 100 mm o más, según los tejidos que se deseen estudiar
6._ DESPARAFINIZACION
Se debe extraer todo la parafina del tejido y aclararlo  nuevamente. Se utiliza Xilol. Dado que los colorantes se hallan en soluciones acuosas, la parafina impedirá su entrada. Como solvente de...