Tecnicas Histol gicas y Microscopia


Técnicas Histológicas y Microscopia
Preparación del Tejido
1º Paso: Obtención de la muestra:
•Biopsia; tejido vivo.
•Autopsia; tejido muerto.
•Necropsia; tejido podrido - necrosado.2º Paso:Fijación:
•En general obtenida mediante el empleo de sustancias químicas individuales o mezclasde estas;
•El fijador de uso más común es la formalina (solución acuosa de formaldehido al 37%);
•Este fijadorno reacciona con los lípidos, por lo tanto es un mal fijador de lasmembranas;3º Paso: Deshidratación:
•Luego después de la fijación, se lava y deshidrata la muestra en una serie desolucionesalcohólicas de concentración creciente hasta llegar al 100%;
•Después de eso, se utilizan solventes como el xileno o tolueno para extraer el alcohol al100%4º Paso: Inclusión:
•Incluir la muestra en la parafinafundida a 60 grados;
•Luego después que la parafina se ha enfriado y endurecido se obterá un bloquedenominado taco;
•Coloca-se el taco en una maquina denominada micrótomo, que se encargará dehacercortes de 5 a 15 µm (micras) (1 micra equivale a milésima parte de 1 milímetro);5º Paso: Coloración:
•Después de los cortes hay que hidratar la muestra con una serie de solucionesalcohólicas en porcióndecreciente para que se pueda colorear con hematoxilina (colorazul) y después otra vez deshidratar con una serie de soluciones alcohólicas en porcióncreciente para que se pueda colorear con eosina(color rosa).
MicroscopiaMicroscopia Óptica
•Microscopio de campo claro: es actualmente el microscopio más utilizado por losestudiantes, ello es el microscopio descendente de los utilizados en el sigloXIX. Suscomponentes son los siguientes:
o Fuente luminosa;
oCondensador;
oPlatina;
oObjetivo;
oOcular.
Las muestras a seren observadas en ese tipo de microscopio tiene que ser extremamentefinas, paraque la luz pase a través de ella, y coloreadas con eosina y hematoxilina. Sin esespré-requisitos la muestra no se produce grado de contraste suficiente para estudio.

Microscopio de campo escuro: en...