tecnicas histologicas

Introducción a la Histología.

La histología estudia los tejidos de los seres vivos. Marcelo Malpighi es considerado como el padre de la histología

¿Por que se estudia?
Porque el poder de resolución del ojo humano es de 0,1 mm, lo que significa que podemos diferenciar dos estructuras como independientes si tienen una distancia mínima de separación de 0,1 mm. La microscopia entonces nospermite aumentar nuestro poder de resolución y nitidez hasta unas 500.000 veces. (Microscopio óptico = 1000 x, microscopio electrónico = 500.000 x)
La histología por su parte nos ayuda a conocer los procesos normales del organismo, averiguando sobre las funciones de los tejidos de los distintos órganos del cuerpo. Se cale de conocimientos fisiológicos y bioquimicos.

Historia de lamicroscopia
1611 Kepler crea el microscopio compuesto (formado por sistemas de lentes que aumenta el poder de resolución)
1665 Hooke describe las células
1881 Retzius describe tejidos animales. Y además Santiago Ramon y Cajal descubren métodos de tinción
1886 Zeiss logra la resolución de estructuras en los límites de la luz visible
1931-1952 Ruska, Siemens, Palada, Porter y Bloo y Spostraud creanel microscopio electrónico de transición (MET) que aumenta la resolución en 500,000x. Su limitación es q solo podía ver cortes, o sea, dos dimensiones
1941 Coens estudia la inmunofluorecencia, que se basa en el hecho de que ciertos cuerpos absorben energía y emiten destellos.
1965 En Cambridge aparece el microscopio electrónico de barrido (MEB) que aumenta la resolución en 20.000x, pero puedemostrar estructuras en 3 dimensiones. Su único inconveniente es que no se puede apreciar la profundidad ya que al intentar enfocar se confunden los planos, y es por eso que ahora utilizamos otro tipo de microscopio, el COFOCAL, una mezcla entre el MET y el MEB

Tipos de microscopio
SIMPLES (sin tinción, utilizan lupas)
1-. De disección
2-. Para estudio de cells vivas
*Contraste de fase Laluz incide o refracta según el peso molecular (densidad) de la
estructura
*De campo oscuro Como hay menos luz, se ve mejor lo fluorescente. Un ejemplo de
esto son las cells que se marcan con plata, para poder estudiar su fisiologia.
*De interferencia Permite cuantificar
COMPUESTOS (varios lentes)
3-. Óptico o de campo claro: La imagen final esta invertida y aumentada. Tiene 3 lentes*Condensador Condensa la luz
*Objetivo Invierte y aumenta
*Ocular Aumenta 10x
4-. De fluorescencia: Dispositivo que capta fluorescencia de sustancias. Existen fluorescencias naturales (nt) y artificiales (fluoresceína). La fluorescencia corresponde al cambio de λ de la luz visible
5-. De luz ultravioleta: Como la luz UV tiene menor λ tiene mas resolución
6-. De polarización: Capta losrayos luminosos emitidos por ciertas moléculas y los lleva a una pantalla para ubicarlas en el espacio.
7-. Microscopio electrónico de Transición (MET): Los electrones viajan del cátodo al ánodo y la diferencia de potencial aumenta su velocidad. Luego se condensa la luz y la imagen se forma ya que algunos electrones atraviesan más que otros (electrodensidad). La pantalla detecta estos electronesy los lleva a una imagen digital. Este microscopio es el de MAYOR RESOLUCION (100.000x)
8-. Microscopio electrónico de Barrido (MEB): En este otro microscopio los electrones rebotan en vez de atravesar la muestra, pues esta cubierta con un metal pesado (generalmente oro). La pantalla detecta los electrones que rebotan y forma una imagen en 3D.
9-. Miscroscopio cofocal: Mezcla las habilidadesdel MET y el MEB
En los microscopios electrónicos la fuente emisora no es luz, sino un choro de electrones, como es el caso del MET que distingue las estructuras electrón-densas (oscuras) de las electrón-lucidas (claras)

Unidades de medida
Ojo desnudo
PODER DE RESOLUCION 0,1 mm
Microscopia óptica
1 µm = micrometro = 10-3 mm = 0,001 mm
PODER DE RESOLUCION 0,25 µm
Microscopia...