tecnicas histologicas

Técnica histológica
Dr. Gabriel Magariños
Definición
La técnica histológica es una serie secuencial de pasos a través de los cuales una
muestra de tejido llega a transformarse en delgados cortes coloreados capaces de ser
observados al microscopio.
Sinopsis general
Paso
Obtención

Objetivos

Medios usuales

- Proveer el material para su - B i o p s i a
estudio al microscopio
-Resección quirúrgica
- Autopsia

Fijación

- Preservar el material
- Evitar la autólisis
- Eliminar los microorganismos

Inclusión

- Embeber el material en un medio - Parafina
fácil de cortar en fetas muy - Acrílicos
delgadas
- Resinas Epoxi

Corte

- Formol al 10 %
- Bouin
- Glutaraldehído

- Lograr láminas muy delgadas que - Micrótomo rotatorio
sean atravesadas por la luz
-M. de deslizamiento
- Ultramicrótomo

Coloración

- Visualizar los tejidos
- Hematoxilina - e o s i n a
- Identificar moléculas en ellos - Tricrómicos
(Histoquímica)
- Histoquímica

Montaje

- Preservar el corte, manteniéndolo - Bálsamo del C a n a d á
aislado del aire y deshidratado
- Medios plásticos

Pasos de la técnica histológica
Obtención
Consiste en la provisión delmaterial que se desea estudiar por medio del
microscopio. El método seleccionado debe ser el adecuado para cada tipo de
material. En todos los casos el instrumental con el cual se seccionan los tejidos debe
estar muy afilado para evitar aplastar sus elementos, así como se debe evitar
cualquier otro tipo de maltrato en su manipulación. Los principales métodos
empleados son: la biopsia, la resecciónquirúrgica y la autopsia.

- La biopsia consiste en la extracción de pequeños fragmentos de tejido de un
organismo vivo. Este procedimiento puede ser realizado de muy diversas formas,
consideraremos algunas:
- biopsia incisional : se realiza seccionando con instrumentos cortantes como el
bisturí.
- biopsia por punch : el punch es un instrumento filoso con forma de sacabocados
que seutiliza para tomar biopsias de piel.
- biopsia por punción
: se realiza con agujas de biopsia y recientemente también
con agujas del tipo intramuscular (microbiopsia).
- biopsia endoscópica: se hace a través de endoscopios, que son instrumentos
flexibles que permiten la observación de algunas cavidades internas del organismo.
- La resección quirúrgica consiste en la extirpación de órganoscompletos o de
grandes partes de los mismos, a través de un procedimiento quirúrgico.
- La autopsia o necropsia es el examen de los órganos luego de la muerte,
generalmente con el objetivo de determinar las causas de la misma.
Cualquiera sea el procedimiento empleado para la obtención, el material que resulta
del mismo debe ser inmediatamente fijado o congelado para evitar los procesos deautodestrucción de las células conocidos como autólisis.
Fijación
La fijación es en esencia un método para la preservación de la morfología y la
composición química de las células y los tejidos. Consiste en producir la muerte de
las células, de manera tal que las estructuras que poseían éstas en el estado viviente
se conserven con un mínimo de modificaciones, a lo largo del tiempo y de lossubsiguientes pasos de la técnica. Asimismo algunos métodos tratan de conservar
intacta su composición química.
La fijación debe realizarse inmediatamente de extraer las células del organismo, para
evitar las lesiones agónicas ocasionadas por la anoxia, que inicialmente producen
cambios osmóticos y luego alteraciones estructurales y bioquímicas más profundas,
fenómenos conocidos en conjunto comoautólisis. Por el mismo motivo los fijadores
deben actuar sobre fragmentos relativamente pequeños de tejidos (como regla
general menos de 1 cm cúbico), para que la difusión del fijador desde las superficies
hasta la parte central del bloque tisular se haga en un tiempo reducido.
Propiedades de los fijadores:
- Producen una rápida muerte celular, evitando la autólisis
- Preservan la morfología...