tecnicas histologicas

TÉCNICAS HISTOLOGICAS
Corte

1. Técnicas histológicas
Denominamos proceso histológico a una serie de métodos y técnicas utilizados para poder estudiar las características morfológicas y moleculares de los tejidos. Hay diversos caminos para estudiar los tejidos, es decir, series de técnicas que se utilizaran dependiendo de qué característica deseemos observar. En el siguiente esquema semuestran los métodos y técnicas comúnmente empleados para el procesamiento de los tejidos. Sin embargo, hay que tener en cuenta que existen muchas variantes a estos caminos su elección dependerá del resultado final que queramos obtener.

El proceso histológico comienza con la obtención del tejido objeto de estudio. En el caso de los tejidos vegetales se toman muestras de los distintos órganos quecomponen el cuerpo de la planta, mientras que para los tejidos animales podemos optar por dos opciones: coger una porción de dicho tejido o procesar una parte, órgano o parte corporal, o el animal completo. En cualquier caso las muestras son habitualmente fijadas con unos soluciones liquidas que contienen unas sustancias denominadas fijadores, las cuales mantienen las estructuras celulares ymoleculares en sus posiciones iniciales durante el procesamiento posterior. También podemos fijar las moléculas de los tejidos por congelación rápida. Fijar un tejido es como si hiciésemos una fotografía del tejido que se mantendrá hasta su observación. Sin embargo, el uso de fijadores o medios de inclusión afectan a veces las características tisulares que queremos observar y por tanto tenemos querecurrir a la congelación para endurecer el tejido para después poder obtener secciones del mismo.
Normalmente, tras la fijación se procede a incluir el tejido para posteriormente obtener secciones. Cuanto más delgada queramos que sea nuestra sección mas tenemos que endurecer nuestra muestra. Esto se consigue embebiendo el tejido con sustancias liquidas que posteriormente polimerizaran (resinas) o sevolverán consistentes (ceras). También se puede conseguir el mismo efecto mediante congelación rápida. Cortes mas gruesos de 40 um se pueden cortar sin necesidad de inclusión usando el vibratomo. Los medios de inclusión son normalmente no hidrosolubles por lo que tenemos que sustituir el agua de los tejidos por solventes orgánicos liposolubles y posteriormente añadir el medio de inclusión.
Tras lainclusión o la congelación se procede a cortar los tejidos. Existen diferentes aparatos de corte que permiten conseguir secciones ultra finas (del orden de nanómetros), semifinas (de 0.5 a 2 um), finas (entre unas 3 y 10 um) y gruesos (mayores a 10 um).
CORTE.
Las características tisulares y celulares microscópicas internas se observan con microscopios ópticos o electrónicos de transmisión(excepto si queremos ver superficies, para lo que usamos el microscopio electrónico de barrido). Con estos aparatos sólo se pueden observar grosores muy pequeños de tejido por problemas de difusión y penetración de la luz en el caso de los microscopios ópticos y de penetración de los electrones en el caso del microscopio electrónico de transmisión. Por tanto tenemos que hacer secciones de los tejidosque queremos estudiar, que pueden ir desde un grosor de unos cuantos nanómetros hasta centenares de micras. Algunos tejidos como los vegetales, por sus características celulares, permiten su observación en secciones de cientos de micras. Como hemos mencionado en los capítulos anteriores, podemos decir que cuanto más delgada queramos hacer una sección de tejido más endurecido ha de estar dichotejido. La dureza de los tejidos depende de sus características (por ejemplo, las paredes celulares hacen a los vegetales tejidos duros), de la fijación que hayamos realizado y sobre todo del material en que hayamos incluido dicho tejido. Una manera más directa de endurecer el tejido es mediante congelación.
Los aparatos mecánicos para hacer secciones de un grosor de micrómetros se denominan...