tecnicas histologicas


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INDICE

Introducción 3
Pasos de las técnicas Convencionales 4
Toma del Material 4
Fijación 4
Deshidratación 4
Aclaración 5
Inclusión 5
Corte 5
Tinción 5
Observación 6
Esquema del Proceso Histológico 8
Bibliografía 9














INTRODUCCION

El proceso histológico consiste en una serie de métodos y técnicas para poder estudiar las características morfológicas y moleculares de los tejidos.Hay diversos caminos para estudiar los tejidos, dependiendo de qué característica deseemos observar.
El proceso histológico comienza con la obtención del tejido objeto de estudio. En cualquier caso las muestras son habitualmente fijadas con unos soluciones líquidas denominadas fijadores, las cuales se usan para mantener las estructuras celulares y moleculares inalterables durante elprocesamiento posterior y con una organización lo más parecida posible a como se encontraban en la muestra viva.
Tras la fijación se procede a incluir el tejido para posteriormente obtener secciones. Cuanto más delgada deba ser más tenemos que endurecer nuestra muestra. Esto se consigue embebiendo el tejido con sustancias líquidas que posteriormente polimerizarán (resinas) o se volverán consistentes (ceras).Posteriormente se procede a cortar los tejidos, es decir, obtener secciones. Existen diferentes aparatos de corte que permiten conseguir secciones ultrafinas (del orden de nanometros), semifinas (de 0.5 a 2 µm), finas (entre unas 3 y 10 µm) y gruesos (mayores a 10 µm). Normalmente las secciones se tiñen con colorantes que son hidrosolubles, por lo que hay que eliminar el medio de inclusión paraque los colorantes pueden unirse al tejido.
Los microscopios opticos ofrecen una gran versatilidad en cuanto a modos de observar los tejidos: campo claro, fluorescencia, contraste de fase, polarización o contraste de interferencia diferencial, mientras que los electrónicos permiten un gran poder de resolución, pudiéndose observar características ultraestructurales. Existen múltiples variacionessobre este esquema general de procesamiento histológico.

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PASOS DE LAS TÉCNICAS CONVENCIONALES

Toma del Material.
Biopsias.
Necropsias.
Improntas.
Frotis de células superficiales.
Frotis de células sanguíneas.
Animales de experimentación.
Aplastados celulares.
Fijación.
Todos los tejidos sufren dos tipos de procesos que son degradativos: autolisis por acción de enzimas intracelulares,y putrefacción por acción bacteriana. Por tanto, la fijación debe realizarse lo más rápido posible luego de tomada la muestra, para evitar los procesos de autolisis, proteger frente a ataques bacterianos, insolubilizar elementos solubles que se quieren estudiar, evitar distorsiones y retracciones tisulares, penetrar y preparar el tejido para poder llevar a cabo tinciones específicas posteriores, si esnecesario, etcétera.
Fijar un tejido es preservar sus características morfológicas y moleculares lo más parecidas posibles a las que poseía en su estado vivo. Existen multitud de fijadores en los manuales de técnicas histológicas. Los métodos de fijación se pueden clasificar en dos tipos: físicos y químicos. Los fijadores físicos se basan o bien en una congelación muy rápida del tejido o bien en laaplicación de calo relevado. Se utilizan cuando los fijadores químicos alteran las estructuras que queremos observar, cuando necesitamos una fijación muy rápida, o cuando el tipo de tejido y la técnica que usaremos lo requiera. Los métodos de fijación por calor no son frecuentemente usados, excepto para el estudio microorganismos. Los métodos químicos utilizan soluciones acuosas compuestas pormoléculas fijadoras que establecen puentes entre las moléculas del tejido, manteniéndolas en sus lugares originales e impidiendo su degradación. Hay dos métodos básicos de fijación con líquidos: inmersión y perfusión, y en cualquier caso el fijador debe llegar a todas las partes el tejido lo más rápidamente posible.
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Deshidratación.
Luego de que la muestra ha sido fijada se debe eliminar el...