Tecnicas
Páginas: 5 (1173 palabras)
Publicado: 6 de julio de 2011
TECNICA MICROSCOPICA PARA EL ANALISIS DE CALIDAD DE AGUA
1.- TOMA DE MUESTRA
La muestra se tomará en un envase de 500 mililitros de capacidad, de vidrio, de boca ancha y con tapa rosca. Se deberá cubrir la tapa del frasco con papel kraft y fijarlo con un cordel.
No se debe exponer la muestra a la luz ni tampoco agitarla. La muestra debe ser analizada en forma inmediata.
Para llenar elfrasco con la muestra, se debe sostener el frasco por la parte inferior y sumergirlo hasta una profundidad de aproximadamente 20 cm, con la boca del frasco ligeramente hacia arriba. Si se trata de una corriente, colocar la boca del frasco en sentido contrario a la corriente del agua.
El tiempo límite entre el muestreo y el inicio del examen bacteriológico es 30 horas. Las muestras deben sertransportadas en condiciones de refrigeración (4-10 °C), en cajas que las conserven en este rango de temperatura. Se debe colocar dentro de la caja hielo o gel refrigerado.
2.- PROTOCOLO
MÉTODO DE FILTRO DE MEMBRANA
La técnica de filtro de membrana se fundamenta en la filtración de un volumen determinado de muestra (100 mililitros) a través de un filtro de membrana de 0,45 micrómetros dediámetro de poro, el cual es colocado sobre un medio de cultivo específico y luego incubado a la temperatura adecuada.
PROCEDIMIENTO ANALÍTICO CON EQUIPOS DE CAMPO PARA LA DETERMINACIÓN DE COLIFORMES
TERMOTOLERANTES POR LA TÉCNICA DE FILTRO DE MEMBRANA MEDICIÓN DE CAMPO
El procedimiento analítico es similar al que se sigue para la determinación de coliformes totales y ter motolerantes porfiltro de membrana en el laboratorio, con la diferencia de que se efectúa en un laboratorio portátil; es decir, en un equipo de campo. En un equipo de campo la bomba de vacío es reemplazada por una bombilla de mano o una jeringa especial.
Aplicar el siguiente procedimiento (OMS, 1988):
1. Esterilizar el sistema de filtración, lo cual debe repetirse entre la filtración de una y otra muestra,para lo cual se usará un combustible —por ejemplo, metanol—. En seguida, tapar el portafiltros con el vaso receptor y esperar 15 minutos. La combustión incompleta del metanol producirá formaldehído y esterilizará la superficie interna del portafiltro.
2. Preparar las placas con caldo selectivo. Abrir la placa petri estéril y colocar una almohadilla o pad.
3. Agregar 2 mililitros de caldoselectivo.
4. Preparar el sistema de filtración según indica la figura.
El portafiltros debe estar estéril y frío.
5. Retirar la parte superior del porta- filtros y, con una pinza flameada y enfriada, colocar una membrana filtrante estéril, con la cara cuadri- culada volteada hacia arriba. Cuidadosamente, colocar la mem- brana sobre la parte superior y en el centro delportafiltros.
Acoplar la parte superior del por- tafiltros, cuidando de no dañar la membrana.
6. Con el fin de controlar la esterilidad
del equipo y del medio de cultivo,
el resultado de esta placa debe
ser negativo. Verter en el embudo
100 mililitros de agua destilada
estéril.
Filtrar el agua destilada, aplicar vacío con una bombilla de mano o con una jeringa especial.
Evitar que seseque la membrana.
7.- Homogeneizar la muestra. Agitar un número no menor de 25 veces, inclinando el frasco y formando un ángulo de 45° entre el brazo y el antebrazo.
8. Verter 100 mililitros de la muestra en el embudo. Observar las mar- cas de graduación que figuran en el interior del embudo.
Filtrar la muestra. Aplicar vacío con una bombilla de mano o con una jeringaespecial.
Lavar dos veces el embudo de filtración con agua de dilución. Aplicar vacío. Evitar que se seque la membrana.
9. Separar la parte superior del potafiltros y, con una pinza previa- mente flameada en sus extremos, retirar la membrana cuidando de que la pinza toque apenas la parte periférica, fuera del área de filtración.
10. Pasar la membrana a la placa de petri, donde...
1.- TOMA DE MUESTRA
La muestra se tomará en un envase de 500 mililitros de capacidad, de vidrio, de boca ancha y con tapa rosca. Se deberá cubrir la tapa del frasco con papel kraft y fijarlo con un cordel.
No se debe exponer la muestra a la luz ni tampoco agitarla. La muestra debe ser analizada en forma inmediata.
Para llenar elfrasco con la muestra, se debe sostener el frasco por la parte inferior y sumergirlo hasta una profundidad de aproximadamente 20 cm, con la boca del frasco ligeramente hacia arriba. Si se trata de una corriente, colocar la boca del frasco en sentido contrario a la corriente del agua.
El tiempo límite entre el muestreo y el inicio del examen bacteriológico es 30 horas. Las muestras deben sertransportadas en condiciones de refrigeración (4-10 °C), en cajas que las conserven en este rango de temperatura. Se debe colocar dentro de la caja hielo o gel refrigerado.
2.- PROTOCOLO
MÉTODO DE FILTRO DE MEMBRANA
La técnica de filtro de membrana se fundamenta en la filtración de un volumen determinado de muestra (100 mililitros) a través de un filtro de membrana de 0,45 micrómetros dediámetro de poro, el cual es colocado sobre un medio de cultivo específico y luego incubado a la temperatura adecuada.
PROCEDIMIENTO ANALÍTICO CON EQUIPOS DE CAMPO PARA LA DETERMINACIÓN DE COLIFORMES
TERMOTOLERANTES POR LA TÉCNICA DE FILTRO DE MEMBRANA MEDICIÓN DE CAMPO
El procedimiento analítico es similar al que se sigue para la determinación de coliformes totales y ter motolerantes porfiltro de membrana en el laboratorio, con la diferencia de que se efectúa en un laboratorio portátil; es decir, en un equipo de campo. En un equipo de campo la bomba de vacío es reemplazada por una bombilla de mano o una jeringa especial.
Aplicar el siguiente procedimiento (OMS, 1988):
1. Esterilizar el sistema de filtración, lo cual debe repetirse entre la filtración de una y otra muestra,para lo cual se usará un combustible —por ejemplo, metanol—. En seguida, tapar el portafiltros con el vaso receptor y esperar 15 minutos. La combustión incompleta del metanol producirá formaldehído y esterilizará la superficie interna del portafiltro.
2. Preparar las placas con caldo selectivo. Abrir la placa petri estéril y colocar una almohadilla o pad.
3. Agregar 2 mililitros de caldoselectivo.
4. Preparar el sistema de filtración según indica la figura.
El portafiltros debe estar estéril y frío.
5. Retirar la parte superior del porta- filtros y, con una pinza flameada y enfriada, colocar una membrana filtrante estéril, con la cara cuadri- culada volteada hacia arriba. Cuidadosamente, colocar la mem- brana sobre la parte superior y en el centro delportafiltros.
Acoplar la parte superior del por- tafiltros, cuidando de no dañar la membrana.
6. Con el fin de controlar la esterilidad
del equipo y del medio de cultivo,
el resultado de esta placa debe
ser negativo. Verter en el embudo
100 mililitros de agua destilada
estéril.
Filtrar el agua destilada, aplicar vacío con una bombilla de mano o con una jeringa especial.
Evitar que seseque la membrana.
7.- Homogeneizar la muestra. Agitar un número no menor de 25 veces, inclinando el frasco y formando un ángulo de 45° entre el brazo y el antebrazo.
8. Verter 100 mililitros de la muestra en el embudo. Observar las mar- cas de graduación que figuran en el interior del embudo.
Filtrar la muestra. Aplicar vacío con una bombilla de mano o con una jeringaespecial.
Lavar dos veces el embudo de filtración con agua de dilución. Aplicar vacío. Evitar que se seque la membrana.
9. Separar la parte superior del potafiltros y, con una pinza previa- mente flameada en sus extremos, retirar la membrana cuidando de que la pinza toque apenas la parte periférica, fuera del área de filtración.
10. Pasar la membrana a la placa de petri, donde...
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