tecnico industrial

PRACTICA DE MICROBIOLOGIA
MEDIDA DEL CRECIMIENTO BACTERIANO
TECNICA DE AISLAMIENTO: PLACA POR ESTRIADO (AGAR CLED)
OBJETIVO
• Lograr un correcto uso del medio de cultivo, por la técnica de placa por estriado.
• Aprender la técnica de estriado, por el medio agar CLED en cajas Petri, y utilizar los instrumentos de laboratorio correctamente.
• Aprender a cultivar bacterias en un medio decultivo, usar el asa de inoculación y realizar estrías de forma correcta.
FUNDAMENTO TEORICO
El Agar Cled es un medio recomendado para siembra en placa por estría para la determinación de bacterias en orina. Este medio favorece el crecimiento de patógenos urinarios y hace distinción en la morfología de las colonias. El Agar Cled carece de electrolitos (sales) necesarios para el crecimiento decierto tipo de bacterias que crecen en el tracto urinario. Las peptonas contenidas en el medio proporcionan el nitrógeno, vitaminas y aminoácidos. La L-Cistina es añadida como suplemento para el crecimiento de coniformes cistina dependientes. La lactosa se incluye como fuente de carbón. Los organismos capaces de fermentar la lactosa bajarán el pH y cambian el color del medio (de verde a amarillo).El azul de bromo timol es empleado como indicador del pH. El Agar bacteriológico se usa como agente gelificante.
MATERIALES
• Un medio de cultivo solido (agar Cled).
• Un mechero de alcohol.
• Alcohol industrial.
• Un asa de inoculación.
• Vestimenta de laboratorio de Microbiología.
• Caja Petri con bacterias.
• Paquete de toallas desechable.
• Funda de basura.
TECNICA EMPLEADA
1.Limpiar la mesa de trabajo con el alcohol industrial.
2. Encender del mechero de alcohol para tener un radio de esterilización.
3. Esterilizamos el asa de inoculación con la ayuda del mechero de atrás hacia adelante.
4. Abrimos la caja Petri con bacteria, cogemos con el asa de inoculación, cerramos la caja Petri.
5. Abrimos la caja Petri con el medio de cultivo (agar Cled).
6. Empezamos aestriar, el primer cuadrante, giramos y seguimos con el siguiente cuadrante, lo hacemos hasta estriar cuatro cuadrantes.
7. Cerramos la caja Petri con el medio de cultivo.
8. Esterilizamos el asa de inoculación.
9. Colocamos el asa en un lugar esterilizado.
10. Colocamos en la incubadora, y esperamos 24 horas.


TECNICA PARA VALIDACION: (AGAR MACCONKEY) PLACA POR PLATEADO
OBJETIVO
• Lograr uncorrecto uso del medio de cultivo, por la técnica de placa por plateado.
• Aprender la técnica de plateado, por el medio agar macconkey en cajas Petri, y utilizar los instrumentos de laboratorio correctamente.
• Aprender a cultivar bacterias en un medio de cultivo, usar hisopo para rellenar de forma horizontal toda la caja Petri, esto permite aislar las bacterias para formar colonias separadas.FUNDAMENTO TOERICO
En el medio de cultivo, las peptonas aportan los nutrientes necesarios para el desarrollo bacteriano, la lactosa es el hidratado de carbono fermentable, y la mezcla de sales biliares y el cristal violeta son los agentes selectivos que inhiben el desarrollo de gran parte de la flora Gram positiva.
Por fermentación de la lactosa, disminuye el pH alrededor de las colonias.
Estoproduce un viraje del color del indicador de pH (rojo neutro), la absorción en las colonias, y la precipitación en las sales biliares. Los microorganismos no fermentadores de la lactosa producen colonias incoloras.

MATERIALES
• Un medio de cultivo solido (agar macconkey).
• Hisopos.
• Una suspensión bacteriana.
• Mechero de alcohol.
• Tubos de ensayo con tapa.
• Vestimenta de laboratoriode Microbiología.



TECNICA EMPLEADA
1. Tomar una pequeña muestra y diluirla en un tubo de ensayo que contiene una solucion de agua de peptona tamponada (1ml).
2. Agitar y diluir la muestra.
3. Encender el mechero de alcohol para tener una radio de esterilización de 50 cm y esterilizar el radio a trabajar.
4. Con la solucion de 1ml, utilizamos el hisopo e introducimos al tubo de...