Tecnologiiiaaaa

UNIVERSIDAD DEL ZULIA FACULTAD DE MEDICINA ESCUELA DE BIOANALISIS CATEDRA DE INMUNOLOGÍA

PRÁCTICA DE AGLUTINACIÓN

JUNIO DE 2009
1

La aglutinación puede definirse como la agregación inmunoquímica específica de partículas (bacterias, eritrocitos, coloides sintéticos, como el látex el carbón y la bentonita) cubiertas con antígeno o anticuerpo. Los antígenos o anticuerpos están unidos a lasuperficie de las partículas mediante fuerzas eléctricas intramoleculares o por uniones químicas covalentes. Las reacciones de aglutinación se clasifican en dos tipos: La aglutinación directa, en la cual el antígeno es un constituyente estructural natural de la célula y el anticuerpo presente en la muestra del paciente aglutina directamente a estos antígenos. Los ejemplos típicos de reacciones deaglutinación directa son la determinación de grupos sanguíneos, determinación de Ac. Heterófilos contra la Mononucleosis Infecciosa y la detección de anticuerpos contra antígenos bacterianos específicos como la determinación de aglutininas febriles. En el primer caso (determinación de grupos sanguíneos, las glicoproteínas que determinan el grupo sanguíneo de un individuo son constituyentesnaturales de la membrana del glóbulo rojo). En la determinación de aglutininas febriles, se detectan en el suero del paciente anticuerpos que reaccionan específicamente contra antígenos bacterianos que están presentes en la membrana celular.

La aglutinación Indirecta, es un tipo de reacción en la cual el antígeno o el anticuerpo es adherido mediante métodos químicos o físicos sobre la superficie deuna célula o sobre la superficie de una partícula inerte que sirve de transportador de esa molécula. La aglutinación de las partículas transportadoras se produce como una reacción secundaria (indirecta). El antígeno (o anticuerpo, según el reactivo que deba detectarse en la muestra de prueba) reviste, física o químicamente, la superficie de las partículas. Si en la muestra se encuentra elanticuerpo o el antígeno específicos, se forman enrejados interconectados. En algunos casos, puede no formarse enrejados visibles aunque se hayan producido reacciones antígeno-anticuerpo de superficie. En este caso puede visualizarse la reacción agregando un reactivo (antiinmunoglobulina) (suero de Coombs). La aglutinación difiere de la precipitación en el tamaño del antígeno que es particulado, laformación de inmunocomplejos se detecta a simple vista, por lo que son mucho más sensibles que las reacciones de precipitación, pero similares a ellas en las restantes propiedades. Es una técnica simple y rápida de realizar, fácil de interpretar, con una sensibilidad y una especificidad adecuadas, que no requiere un equipo complejo. Las inmunoglobulinas que aglutinan mejor son las IgM. 2

Cuando lascélulas que se utilizan son glóbulos rojos (GR) la reacción se denomina hemaglutinación la cual a su vez puede ser directa (determinación de grupos sanguíneos) o indirecta (el glóbulo rojo trasporta a un antígenos que no le es propio). El tratamiento de los GR con ácido tánico es uno de los métodos más usados para adherir antígenos proteicos. Su acción sobre la membrana es análoga al tratamiento conenzimas proteolíticas, las cuales exponen en la célula un mayor número de receptores para las proteínas lo que permite que se cubran con una alta densidad de antígeno aumentando la sensibilidad de la reacción. Se requiere de Ags altamente purificados y su preparación es laboriosa; sin embargo, se usa con mucha frecuencia debido a su alta sensibilidad y por la estabilidad del reactivo.DETERMINACIÓN DE GRUPOS SANGUÍNEOS

Los grupos sanguíneos no son más que moléculas glicoproteínas o lipoproteínas que se encuentran unidos y distribuidos a todo lo largo y ancho de la membrana plasmática de los GR, leucocitos, plaquetas y en algunos casos puede encontrarse presente en otros tejidos del organismo. Son considerados antígenos porque al ingresar a un organismo que no los posea, pueden...