tema 1

Tema 1
Técnicas Histológicas
Obtención del material histológico para estudiar
Proceso de fijación
Lavados
Deshidratación
Aclaramiento
Infiltración
Inclusión
Microtomía
Tinción
Obtencióndel material histológico
Los tejidos se pueden obtener de diferentes formas:
Biopsia
- Biopsía excisional - Biopsia incisional - Biopsía endoscópica - Biopsia colposcópica - Punción aspiración conaguja fina (PAAF) - Biopsia por punción con aguja gruesa (Tru-cut)
Abiopsia
Necrocirugía (necropsia/autopsia)
Fijación
En este paso el tejido obtenido se coloca en una sustancia fijadora paraevitar los cambios post-mortem. Unos de los fijadores más usado es el formol al 10% (formaldehido). En el caso de que utilicemos más adelante el microscopio electrónico,usaremos glutaraldehído (para proteínas) u osmio (para lípidos).
Lavados
Se debe lavar el tejido para quitar el exceso de fijador.
Deshidratación
Suena incoherente que se deba lavar el tejido y después deshidratarlo. El exceso defijador al momento de la infiltración, incluso en la microtomía, podría afectar los cortes histológicos, y por ello se debe lavar. La deshidratación se hace empleando diferentes soluciones de alcohol deconcentración creciente.
Aclaramiento
En este paso se sustituye el alcohol por un disolvente de parafina. El más usado es el xilol (xileno) ya que como la muestra está deshidratada, el xilol entraráhasta lo más profundo del tejido. También el tejido pierde color y adquiere un tono acaramelado.
Infiltración
En este paso la muestra se coloca en parafina líquida, cabe mencionar que se debe usarparafina histológica. Como se ha dicho en el paso anterior el tejido está completamente lleno de xilol, ahora debido a ósmosis sale el xilol y entra la parafina.
La deshidratación, aclaramiento einfiltración pueden ser realizadas manualmente pero hoy en día se realizan de modo automático en máquinas específicas.
Inclusión
Aquí se forman bloques de parafina dentro de los cuales están las...