Tema 2
Páginas: 56 (13797 palabras)
Publicado: 17 de marzo de 2015
Curso 201213. Ciclo Superior de Laboratorio de Diagnóstico Clínico. Fundamentos y técnicas de análisis bioquímico.
Tema 2. Técnicas espectrométricas
TEMA 2. TÉCNICAS ESPECTROMÉTRICAS:
1. ESPECTROFOTOMETRÍA DE ABSORCIÓN MOLECULAR
2. FLUORIMETRÍA
3. QUIMIOLUMINISCENCIA
4. ESPECTROFOTOMETRIA DE ABSORCION ATOMICA
5. FOTOMETRIA DE LLAMA
6. NEFELOMETRIA Y TURBIDIMETRIA 7. ESPECTROMETRÍA DE MASAS
8. REFRACTOMETRÍA
Las técnicas espectrométricas se basan en la interacción de las radiaciones electromagnéticas con la
materia. Las principales técnicas espectrométricas empleadas en la actualidad en los laboratorios de
bioquímica clínica son:
La espectrometría de absorción molecular en el ultravioleta y en el visible
La fluorimetría La turbidimetría
La nefelometría
La luminometría
La espectrometría de absorción atómica
La espectrometría de emisión atómica
Naturaleza de la radiación electromagnética
La radiación electromagnética es una forma de energía radiante;se
representa como un campo
eléctrico y otro magnético situados en fase y con oscilaciones sinusoidales en ángulo recto un campo respecto al otro y, a su vez, con la dirección de propagación;
se propaga por lo tanto en forma de ondas.
En este fenómeno ondulatorio se definen:
Longitud de onda (λ): se define como la distancia entre 2 máximos de un ciclo completo del movimiento
ondulatorio; esta distancia se expresa, según el Sistema Internacional de Unidades (SI) en nanómetros (nm
9
,10
m); otras unidades ya obsoletas son: ángstrom (A) y milimicra (mµ);
la relación entre estas medidas es:
9
1nm = 1mµ = 10 A = 10
m.
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Curso 201213. Ciclo Superior de Laboratorio de Diagnóstico Clínico. Fundamentos y técnicas de análisis bioquímico.
Tema 2. Técnicas espectrométricas
Frecuencia (v): es el número de oscilaciones (ciclo) que una partícula realiza en una unidad de tiempo, generalmente un segundo (ciclos por segundo);
es la inversa de la longitud de onda.
v = c/λ
siendo c = velocidad de la luz
Pero es que además la luz está formada por fotones, o paquetes discontinuos de
energía
;
la energía
de un fotón depende de su frecuencia y de su longitud de onda:
E = h.v siendo v = frecuencia y h = constante de Planck
E = h. c/λ
Por lo tanto la
relación entre la
longitud de onda y la energía de una radiación electromagnética es
inversa
: cuanto mayor es la longitud de onda, menor es la energía; por ejemplo, la radiación UV a
200 nm posee mayor energía que la radiación infrarroja a 750.
La relación de la longitud de onda con la frecuencia y con la energía de radiación es inversa, por lo que las
radiaciones más energéticas
, las más penetrantes, son a su vez las de
mayor
frecuencia
y
menor
longitud de onda
Se denomina
espectro electromagnético al conjunto de radiaciones electromagnéticas, y se ha
dividido en
varias
regiones o
bandas espectrales caracterizadas por determinados parámetros de longitud de onda,
frecuencia etc.
Espectroelectromagnético
RADIACIONES EM
Longitud de onda (nm)
Rayos gamma
5 3
10
10
Rayos X
3 1
10
10
Ultravioleta
200380
Luz Visible
380780
Infrarrojo
78050.000
Microondas
8 9
10
10
Frecuencias de Radio
9
>10
El ojo humano responde a la radiación electromagnética entre los 380 y los 750 aproximadamente,
pero actualmente disponemos de instrumentos que suplen nuestra limitación, y permiten la medida de
radiaciones de longitudes de onda mayores (IR) y menores (UV).
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Curso 201213. Ciclo Superior de Laboratorio de Diagnóstico Clínico. Fundamentos y técnicas de análisis bioquímico.
Tema 2. Técnicas espectrométricas
La luz solar, o la luz emitida por un filamento de ...
Tema 2. Técnicas espectrométricas
TEMA 2. TÉCNICAS ESPECTROMÉTRICAS:
1. ESPECTROFOTOMETRÍA DE ABSORCIÓN MOLECULAR
2. FLUORIMETRÍA
3. QUIMIOLUMINISCENCIA
4. ESPECTROFOTOMETRIA DE ABSORCION ATOMICA
5. FOTOMETRIA DE LLAMA
6. NEFELOMETRIA Y TURBIDIMETRIA 7. ESPECTROMETRÍA DE MASAS
8. REFRACTOMETRÍA
Las técnicas espectrométricas se basan en la interacción de las radiaciones electromagnéticas con la
materia. Las principales técnicas espectrométricas empleadas en la actualidad en los laboratorios de
bioquímica clínica son:
La espectrometría de absorción molecular en el ultravioleta y en el visible
La fluorimetría La turbidimetría
La nefelometría
La luminometría
La espectrometría de absorción atómica
La espectrometría de emisión atómica
Naturaleza de la radiación electromagnética
La radiación electromagnética es una forma de energía radiante;se
representa como un campo
eléctrico y otro magnético situados en fase y con oscilaciones sinusoidales en ángulo recto un campo respecto al otro y, a su vez, con la dirección de propagación;
se propaga por lo tanto en forma de ondas.
En este fenómeno ondulatorio se definen:
Longitud de onda (λ): se define como la distancia entre 2 máximos de un ciclo completo del movimiento
ondulatorio; esta distancia se expresa, según el Sistema Internacional de Unidades (SI) en nanómetros (nm
9
,10
m); otras unidades ya obsoletas son: ángstrom (A) y milimicra (mµ);
la relación entre estas medidas es:
9
1nm = 1mµ = 10 A = 10
m.
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Curso 201213. Ciclo Superior de Laboratorio de Diagnóstico Clínico. Fundamentos y técnicas de análisis bioquímico.
Tema 2. Técnicas espectrométricas
Frecuencia (v): es el número de oscilaciones (ciclo) que una partícula realiza en una unidad de tiempo, generalmente un segundo (ciclos por segundo);
es la inversa de la longitud de onda.
v = c/λ
siendo c = velocidad de la luz
Pero es que además la luz está formada por fotones, o paquetes discontinuos de
energía
;
la energía
de un fotón depende de su frecuencia y de su longitud de onda:
E = h.v siendo v = frecuencia y h = constante de Planck
E = h. c/λ
Por lo tanto la
relación entre la
longitud de onda y la energía de una radiación electromagnética es
inversa
: cuanto mayor es la longitud de onda, menor es la energía; por ejemplo, la radiación UV a
200 nm posee mayor energía que la radiación infrarroja a 750.
La relación de la longitud de onda con la frecuencia y con la energía de radiación es inversa, por lo que las
radiaciones más energéticas
, las más penetrantes, son a su vez las de
mayor
frecuencia
y
menor
longitud de onda
Se denomina
espectro electromagnético al conjunto de radiaciones electromagnéticas, y se ha
dividido en
varias
regiones o
bandas espectrales caracterizadas por determinados parámetros de longitud de onda,
frecuencia etc.
Espectroelectromagnético
RADIACIONES EM
Longitud de onda (nm)
Rayos gamma
5 3
10
10
Rayos X
3 1
10
10
Ultravioleta
200380
Luz Visible
380780
Infrarrojo
78050.000
Microondas
8 9
10
10
Frecuencias de Radio
9
>10
El ojo humano responde a la radiación electromagnética entre los 380 y los 750 aproximadamente,
pero actualmente disponemos de instrumentos que suplen nuestra limitación, y permiten la medida de
radiaciones de longitudes de onda mayores (IR) y menores (UV).
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La luz solar, o la luz emitida por un filamento de ...
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