TEMA 7

Tema 7.2
Cultivos secundarios:
Cuando uno o varios cultivos de células de un cultivo primario se re-siembran, el cultivo obtenido
se llama cultivo secundario.
Líneas celulares:
Una vez que un cultivo primario se subcultiva (re-siembra o pasa) se llama línea celular.
Tipos generales de líneas celulares:
1. Línea celular finita: Es un subcultivo primario. Puede ser un mezcla de tipos celulares,con
duplicación finita. Si seleccionamos un tipo celular (mediante clonaje, separación física…)
obtenemos una cepa.
2. Línea celular continua: Cultivos celulares obtenidos a partir de líneas celulares primarias que
se han transformado.Línea celular que tiene la capacidad de supervivencia infinita. Es un
subcultivo que ha demostrado posibilidades de ser subcultivado in vitro indefinidamente.Características de líneas celulares:
1. Inhibición por contacto: Inhibición del ondulamiento de la membrana plasmática y la motilidad
celular cuando las células están en contacto con otras adyacentes.
2. Limitación de la densidad celular durante la proliferación: Inhibición mitótica con el incremento
de la densidad celular.
3. Senescencia: Cuando las células finitas replican su DNA, los extremos terminalesde los
cromosomas (telómeros) no poseen la capacidad de replicarse. Por tanto en cada replicación
celular se van acortando y la célula entra en senescencia.
4. Crecen hasta un límite de generaciones celulares, entre 20 y 80 doblajes de la población
celular. Cuando se trabaja con este tipo de cultivos es importante saber el número de doblaje
en el que se encuentra el cultivo.
Línea celularcontínua:
Las líneas celulares finitas pueden ser propagadas de forma inalterada por un número limitado de
generaciones, por lo que mueren o dan lugar a líneas celulares continuas. La alteración en un
cultivo dando origen a una línea celular continua se llama transformación in vitro, y puede ocurrir
de forma espontánea o inducida con agentes químicos o virus.
Estas células pueden expresar lascaracterísticas de transformación maligna o neoplasia in vitro.
La línea celular continua expresa la enzima telomerasa, la cual participa en la replicación de los
telómeros. La célula puede replicarse indefinidamente y alcanzar la categoría de línea celular
inmortal.
Las líneas continuas han escapado del control de la senescencia así que el número de
generaciones es menos importante y es más importante conocerel número de pase.
Al realizar un transformación sobre una línea celular, se consigue una línea celular infinita
(inmortalizamos la línea celular in vitro, con duplicación infinita). En ese caso, se trata de una línea
celular continua o establecida.
Transformación: Si derivan de cultivos primarios tumorales no hace falta…si derivan de cultivos
primarios normales…se puede conseguir medianteintroducción de oncogenes o con tratamiento
con carcinogénesis. También pueden seguir de forma espontánea.

Propiedades de las líneas celulares finitas y contínuas:

Euplodía: es el estado celular en el cual la la célula tiene uno o más juegos completos de
cromosomas (dotaciones monoploides (x)) de su especie; dependiendo de especies, se excluyen
los cromosomas sexuales. Los individuos con euplodíapueden presentar o no un número anormal
de cromosomas diferente al habitual.
Aneuploidía: Hace referencia al cambio en el número cromosómico. Un aneuploide es un individuo
cuyo cromosomas diferente del tipo salvaje o euploide en parte de su dotación cromosómica,
debido a una cromosoma extra o ausente. La dotación cromosómica aneuploide sólo difiere de la
salvaje en uno o pocos cromosomas.

Parámetrosimportantes para la selección de una línea celular:
1. Finita o continua: Las líneas continuas son más fáciles de manejar, pero pueden carecer de los
fenotipos deseados (finita = línea primaria). Además, las líneas continuas gozan de mayor
eficiencia de clonaje y producción celular y mejor adaptación a medios sin suero.
2. Transformada o no transformada: Tumorogénesis (inmortales) o no...