Temes_9 11modificatFINAL

Creixement i control
1. DIVISIÓ CEL·LULAR
Els bacteris són organismes unicel·lulars i la seva manera de multiplicar-se és per divisió
bacteriana, per un procés de fissió binària, a partir d’una cèl·lula progenitora apareixen
dues filles (divisió asexual).
Etapes
1. Separació de les cadenes d’ADN després d’haver-se duplicat
2. Creixement de la membrana entre els mesosomes
3. Síntesi del septe(tros de paret bacteriana per on es trencaran)
4. Separació de les cèl·lules
filles Aquest procés és una
generació.
Creixement cel·lular i poblacional
El creixement, en els éssers poblacionals, és un
augment ordenat de tots els components cel·lulars i un
augment de massa. En els unicel·lulars, en canvi, el
creixement és l’augment del número de cèl·lules.
Una fissió binària és una divisió asexual d’unacèl·lula en
dues. L’E. Coli, triga 20 minuts en completar el seu
creixement en condicions òptimes.
És un creixement exponencial, els bacteris creixen de
manera exponencial.
El creixement, inicialment, malgrat que és progressiu i
exponencial, és molt lent, però posteriorment, augmentarà
molt.

1

Mesures de la massa cel·lular
Als laboratoris és interessant mesurar la massa cel·lular
1. Mètodesdirectes
o Pes humit (poc precís)
o Pes sec (15-20% del humit, més precís, 1 mg
~109 cèl.) o Nitrogen total (si saps quant N2 té
un bacteri)
o Quantificació DNA, RNA, Proteïnes, Peptidoglicà, etc.
2. Mètodes indirectes
o Consum/producció d’un metabòlit (O2; CO2/ producció àcids)
o Mètodes òptics (mesures de la terbolesa). La dispersió de la llum és proporcional a la massa
de cultiu
Escala deMacFarland. Patró de terbolesa coneguda calibrada
prèviament (1% de Cl2Ba + quantitats creixents de SO4H2 al 1%; precipita, SO4Ba,
responsable de la terbolesa).
Espectrofotòmetre/ Colorímetre. Mesura l’absorbància (Densitat Òptica). La
proporcionalitat entre la massa i l’A és vàlida per >107 cèl/ml
La sensibilitat augmenta a longituds d’ona
baixes. DO=A= -LogT/100 (T=
Transmitància)

3. Recomptes decèl·lules totals
o Recompte directe amb microscopi òptic
a. Recompte de Breed

b. Recompte en volum: cambres de recompte de Petroff-Hausser

o Microscòpia electrònica
o Comptadors electrònics de partícules (Coulter counter). Són contadors electrònics de
partícules, una màquina que conta el número de partícules que passen a través d’una
sonda.

2

4. Recomptes directes de cèl·lules viables
Les cèl·lulesviables són les que estan vives o les pots recuperar en un cultiu.
o Recompte de viables en placa (medi sòlid)
Recompte de CFU’s. Tenint en compte les dissolucions que s’han realitzat, es
conten les cèl·lules.

o Recompte en líquid (nombre més probable)
És un recompte aproximat.
Es van fent dissolucions, de les quals s’agafen 3 consecutives. S’inoculen, per cada
dissolució, en 5 tubs diferents.S’incuben, i es conten quins tubs s’han quedat terbis.
Després, amb una taula, i la combinació obtinguda, et diu quin es el nombre més probable
tens.

Recompte del nombre més probable
en placa Diposites gotes diferents, en una
càpsula de petri que prèviament ha estat
dividida en diferents zones, es posen a
incubar, i comptes quines gotes han fet
colònia. Una taula com l’anterior, t’indica
quantescèl·lules tenies inicialment.

3

o Recompte en filtre de nitrocel·lulosa (vàlid per un nombre baix d’individus)
La bactèria queda retinguda en un filtre, posem en una placa de cultiu i es faran colònies
que podrem comptar.

Fases clàssiques de creixement d’un cultiu microbià

1. Fase de latència (lag time)
La fase de latència varia segons el microorganisme i les condicions culturals de creixement(medi, temperatura, pH, tensió d’oxigen, etc.)
Durant aquesta fase:
- Hi ha activitat metabòlica (poc o nul creixement
- Síntesi de components (ATP, rRNA, tRNA, proteïnes ribosomals) i
d’enzims i cofactors necessaris per poder utilitzar els nutrients que hi ha al
medi.
- Biosíntesi de nutrients i elements essencials no presents al medi.
La durada pot variar molt en funció del inòcul (estat i...