Teoria De Electroforesis


ELECTROFORESIS

La electroforesis es un método de la Química Analítica que utiliza una corriente eléctrica controlada con la finalidad de separar biomoleculas según su tamaño y carga eléctrica a través de una matriz o medio que le permite su movilidad.

         Fue empleado por primera vez por  en el año 1937, pero su importancia vino a incrementarse cuando en los años cincuenta E. L.Durrum yArne W.K. Tiselius , impulsaron la electroforesis de zona, nombre que se asignó a la separación de materiales en un campo eléctrico en presencia de algún tipo de soporte; aunque este término se limitó originalmente al análisis de coloides y partículas submicroscopicas, se ha convertido en estos últimos años en una metodología aplicada a sustancias de baja masa molecular.
Fundamento. 
Es lamigración de iones pequeños y macromoléculas (partículas) cargadas en un solvente conductor bajo la influencia de un campo eléctrico.
       Cuando una mezcla de moléculas ionizadas y con carga neta son colocadas  en un campo eléctrico, estas experimentan una fuerza de atracción hacia el polo que posee carga opuesta, dejando transcurrir  cierto tiempo las moléculas cargadas positivamente se desplazaranhacia el cátodo (el polo negativo) y aquellas cargadas negativamente se desplazaran hacia el ánodo (el polo positivo). 








Las electroseparaciones de diferentes especies se basan en el diferente comportamiento bajo la influencia del campo eléctrico aplicado. Existen seis reglas fenomenológicas que describen los tipos de factores que se presentan en electroforesis:

1. Los iones negativostienden a migrar hacia el potencial más alto (positivo) y los iones positivos tienden a migrar hacia el potencial más bajo (negativo).



La siguiente se trata que cuando un cuerpo cargado se coloca en un campo eléctrico, se ejerce una fuerza sobre él, que es proporcional a la carga de la partícula en movimiento y al potencial aplicado.

2. La velocidad media demigración de un analito es proporcional a la carga media del ion.

3. La velocidad media de migración de un analito es proporcional al potencial del medio aplicado.








En otras palabras,
La velocidad media de migración del analito(V) es proporcional a la carga media del ion (q) y a el gradiente de potencial eléctrico (E) e inversamente proporcional al coeficiente de fricción (f) relativo a la tallay forma de la molécula, es decir, a la resistencia que le ofrece el medio.

V= qE/f

4. la velocidad transversal media del movimiento de un ion es inversamente proporcional a su sección transversal media.La sección transversal media: es el área del ion que es perpendicular a la dirección del movimiento, esto significa, que un ionmonovalente grande se mueve más lentamente que un ion monovalente más pequeño.

Con estas cuatro reglas podemos ahora comprender las bases de la mayoría de los métodos que se engloban en la palabra y significado de Electroforesis (del griego phoresis, que significa ser llevado). La electroforesis separa los iones debido a la diferencia de la relación carga-tamaño. La Electroforesis y la espectrometría demovilidad iónica se basan en las 4 primeras reglas fenomenológicas juntas.

Al igual que en cromatografía, la difusión tiende a originar un ensanchamiento longitudinal de las bandas de desplazamiento, pero en las electroseparaciones el proceso que suele ser llamativo es la convección, que va a reducir la calidad de las separaciones. La CONVECCION: Es un fenómeno no deseable en Electroforesis,consiste en el transporte de todo tipo de especies, cargadas y no cargadas. Puede ser por flujo hidrodinámico por diferencias de presión en los extremos de una columna o por capilaridad.










Esto nos confirma la 5ta regla:
La calidad de las electroseparaciones mejora cuando se suprime la convección.
Hay dos maneras de eliminar la convección en un líquido:
Realizar electroseparaciones sobre...