Tesis Adolfo 6



Centro de Investigación y de Estudios Avanzados del Instituto Politécnico Nacional
Unidad Irapuato
Departamento de Biotecnología y Bioquímica
Programa Educativo de Biotecnología Agrícola


“Respuesta de Maíz (Zea mays) a la inoculación con bacterias rizosféricas aisladas de gramíneas (Zea mays y Buchloe dactyloides) en condiciones de invernadero”.
TESIS
Que para obtener el grado de:
INGENIEROEN BIOTECNOLOGÍA AGRÍCOLA.

Presenta:
T.S.U. Jesús Adolfo Flores Torres

Director de tesis:
Dr. Juan José Peña Cabriales.

Asesor Académico:
M. C. Jesús Piña Guillén

Irapuato, Gto. 8 de Febrero, 2014


Lugar de Estadía:
Centro de Investigación y de Estudios Avanzados del Instituto Politécnico Nacional, Unidad IrapuatoDirector de Tesis
Dr. Juan José Peña Cabriales



Asesor Académico:
M. C. Jesús Piña Guillén






Izúcar de Matamoros, Puebla, México. Mayo de 2014





























Dedicatorias





A mi familia que me han apoyado a lo largo de este tiempo.
Isabel Lázaro Hernández.
Elvira Torres Vergara
Enrique Domínguez López
Arturo Salvador Flores Torres
Juana Brisia Flores Torres
FrancisDomínguez Torres
Ernesto Domínguez Torres
Especialmente a mi abuela † Esperanza Vergara Tapia (D. E. P) por ser una mujer fuerte y que en el momento de finalizar mi estancia en Irapuato, Gto inició su viaje hacia su descanso.





A todos los profesores por la disposición total. Especialmente a aquellos que aportaron una parte esencial en este proceso formativo.
Jesús Piña Guillén
Narciso CastilloSanguíno
Eulalio Rivera López
Mayra Sánchez Cruz



Agradecimientos
A CINVESTAV-IPN, Unidad Irapuato por brindar las instalaciones para llevar a cabo el proyecto de investigación de tesis.
Al Dr Juan José Peña Cabriales por permitirmea que se realizara mi sueño de estar en un centro de investigación. Y al equipo de trabajo encomendado a su cargo.
Dr. Areli
Dr. Milton Barcos.
M. C. José AntonioVera,
M. C. Sergio Abraham Hernández.
M. C. Luis León.
Ing. Maria Magdalena Cervantes Juan.
IBQ. Coyolxauhqui Barrera.
ITEA. Ramón Muñiz
ITEA . Felipe Quintanilla
ITEA. Carlos Gerardo Marmolejo Chávez.
T.S U. Israel Penagos
IBQ. Luis Ernesto Hernández.
Ing. José Abraham García Berúmen,
Ing. Conrado
A Paco, Alfredo, Alfonso, Sandra por su ayuda y convivencia durante este tiempo.I. RESUMEN 13
II. INTRODUCCIÓN 14
III. ANTECEDENTES 16
Guanajuato, territorio y agricultura. 16
Nitrógeno 17
Fertilizantes Nitrogenados 17
La biotecnología como arma de doble filo 18
Microbiología del suelo. 18
Fijación del nitrógeno en la experiencia del hombre. 19
Fijación Biológica del Nitrógeno 20
PGPR 21
Pruebas bioquímicas aplicadas a los biofertilizantes. 22
Determinación de laenzima Ureasa 22
Fermentación de fuentes de carbono. 22
Reacción Salkowsky 22
AIA 23
Sideróforos 23
Genes implicados en la fijación del nitrógeno 24
JUSTIFICACIÓN 25
IV. HIPÓTESIS 25
V. OBJETIVOS 26
Objetivo general 26
Objetivos específicos 26
VI. ESTRATEGIA EXPERIMENTAL 27
VII. MATERIALES Y MÉTODOS 28
VIII. 2 Caracterización del suelo 28
VIII. 3. Aislamiento de bacterias diazotrofas rizosféricas.29
VIII. 4 Purificación en medio PDA, GYC y WL 30
VIII. 5 Ensayo de Reducción de Acetileno (ARA) 30
VIII. 6 Caracterización microbiológica Clásica 31
Morfología microscópica 32
Utilización de la urea 32
VIII. 8 Detección de las capacidades de promoción de crecimiento vegetal 33
Bacterias Productoras de Sideróforos 33
Bacterias Solubilizadoras de fosfato inorgánico 33
VIII. 9 Selección de cepas ausarse en bioensayo en invernadero 34
Ensayo de invernadero 34
Preparación de macetas. 35
Preparación del inóculo en semilla. 35
Siembra en macetas 36
Especificaciones del hibrido H-374 C 36
Fenología del maíz 37
VIII. RESULTADOS 39
Aislamientos 39
Purificación 40
Microbiología clásica 41
Producción de Sideróforos 42
Medio PVK 42
Ensayo de germinación en cajas petri estériles y en papel húmedo....