tesis

“Año de la Integración Nacional y el Reconocimiento de Nuestra Diversidad”








TÉCNICA DE ELISA


CARRERA PROFESIONAL:
LABORATORIO CLÍNICO
PROFESOR:
César SÁNCHEZ ALPACA
ALUMNAS:
VERONICAPABLO ÑAUPARI
SEMESTRE:







VI
JAUJA – PERÚ
2013
INDICE

INTRODUCCIÓN 3
CONCEPTO 4
GENERACIONES DE ELISAS 6
Primera generación 6
Segunda generación 6
Tercera generación 6
FASES DE UN ENSAYO ELISA 7
1. Conjugación del anticuerpo o del antígeno con una enzima (peroxidasa, fosfatasa alcalina) 7
2. Unión del antígeno(o delanticuerpo) a los pocillos 8
3. Revelado de la reacción enzimática 9
DISPOSITIVOS EMPLEADOS EN ELISA 10
CLASIFICACIÓN 11
1) ELISA directo (ensayo ELISA simple de dos capas) 11
2) ELISA sándwich “DAS” (Double Antibody Sandwich): 13
3) ELISA Sándwich “HADAS”: 13
Consta de las siguientes etapas: 13
14
4) ELISA Competitivo: 15
MARCADORES ENZIMÁTICOS MAS COMUNMENTE UTILIZADOS EN ELISA 16CARACTERÍSTICAS QUE DEBEN REUNIR LAS ENZIMAS PARA ELISA 19
LIMITACIONES DEL ELISA 20
INTERPRETACION DE RESULTADOS 20
1. No reactiva 20
2. Reactiva 21
APLICACIONES DEL ELISA. 21
Diagnóstico de enfermedades virales 21
Diagnóstico de enfermedades parasitarias 21
Respuesta humoral en enfermedades autoinmunes 22
Endocrinología 22
MÉTODO DE ELISA EN EL DIAGNOSTICO VIRAL 23
ELISA APLICADA EN LARUBEOLA 24
Significación y aspectos generales 24
Fundamento de la prueba elisa 26
CONCLUSIONES 27
BIBLIOGRAFÍA 28



















INTRODUCCIÓN





Ensayo por inmunoabsorción ligado a enzimas”, también conocido como ELISA, es tal vez el método de diagnóstico más reconocido vía inmunoanálisis, llamado “laboratorio húmedo”, que es usado por la mayoría de empresasbioquímicas en actualmente. ELISA utiliza el método de inmunoanálisis para ver si los organismos o virus que provocan enfermedades están presentes en una muestra líquida; por eso es llamado laboratorio húmedo. Elisa podrá determinar la presencia del “analito” usando reactivos líquidos y sustancias químicas en el análisis que más adelante pueden ocasionar una marca que calificará y también,evaluará el “analito” en la muestra. ELISA es vital para determinar la presencia de una enfermedad y buscar formas para curarla o eliminarla.
CONCEPTO

La técnica de ELISA es un ensayo inmunoenzimático ampliamente empleado en el área médica para la cuantificación de moléculas especialmente de aquellas que experimentan cambios en diferentes estados como pueden ser infecciones por bacterias,virus, hongos o parásitos o fases activas de enfermedades autoinmunes. Como ejemplo se pueden medir por ELISA hormonas, autoanticuerpos, inmunoglobulinas contra antígenos de patógenos, toxinas, antígenos. Las técnicas de ELISA son también muy usadas en los ensayos de nuevos medicamentos para comprobar sus efectos cuantificando las moléculas de interés en cada caso. Existen numerosasvariantes de este tipo de ensayo. Entre ellos se encuentran los métodos directo e indirecto. El método directo permite la detección del antígeno con un anticuerpo específico conjugado con una enzima como sistema de marcaje. En el método indirecto el antígeno reacciona con el anticuerpo específico. El complejo antígeno-anticuerpo es entonces detectado por un segundo anticuerpo que reconocedominios constantes de anticuerpos. Este anticuerpo, que suele ser específico de especie, es el que está marcado enzimáticamente. Esto permite que un mismo anticuerpo marcado sea capaz de detectar diferentes antígenos. En ambos métodos, la reacción enzimática puede ser detectada espectrofotográficamente con un lector ELISA.

Se usa en muchos laboratorios para determinar si un anticuerpo particular...