Test De ELISA

español

TEST ELISA
PARA CHAGAS III
BiosChile Ingeniería Genética S.A., Santiago, Chile.

Sólo para uso diagnóstico in vitro
Ensayo inmunoenzimático in vitro para la detección cualitativa de anticuerpos de la clase IgG dirigidos contra el Trypanosoma
cruzi en muestras de suero o plasma humano.
I) RESUMEN
La enfermedad de Chagas es una enfermedad crónica causada por la infección con el protozoo T.cruzi. El parásito es
transmitido a los seres humanos por un grupo de insectos de la familia Reduvidae, siendo la Vinchuca (Triatoma infestans)
el vector principal (1). La infección también puede transmitirse en forma congénita, por transfusiones sanguíneas o
transplante de órganos. Esta infección afecta en grado variable diversos órganos y sistemas, especialmente el corazón y
el tubo digestivo(2). La enfermedad es endémica desde el sur de Estados Unidos (3) hasta el centro de Chile y sur de
Argentina (2, 4).
La respuesta inmune humoral a la infección, puede ser detectada en forma rápida por el Test ELISA para Chagas III (5).
Este ensayo es adecuado para el análisis de un gran número de muestras de suero o plasma, lo que lo hace especialmente útil en Bancos de Sangre y LaboratoriosClínicos.
BiosChile Ingeniería Genética S.A. ha desarrollado el ensayo Test ELISA para Chagas III pensando en aportar al Banco
de Sangre un producto confiable, seguro y fácil de usar. Es así como el ensayo se presenta en placas de 96 pocillos
desmontables, cada solución y control tiene un color diferente, la solución de dilución cambia de color al agregar la
muestra, diferenciando claramente lospocillos que contienen muestras de los que contienen controles y de los que aún
no han sido cargados. Además, el sustrato viene premezclado, lo que permite disminuir el número de pasos a realizar.
II) FUNDAMENTOS DEL ENSAYO
El Test ELISA para Chagas III es un ensayo inmunoenzimático en fase sólida para la detección cualitativa de anticuerpos
contra T. cruzi. Se realiza en placas cuyos pocillos han sidoactivados con extractos totales de las cepas de T. cruzi
Tulahuén y Mn (6), incluyendo antígenos de membrana altamente inmunogénicos. El recubrimiento de los pocillos se
realiza mediante una novedosa tecnología consistente en la utilización de un adhesivo biológico que facilita la inmovilización de los antígenos y aumenta la estabilidad de la placa activada (7). Si las muestras analizadas contienenanticuerpos
específicos para T. cruzi, éstos formarán un complejo estable con los antígenos que recubren los pocillos. El material
unido en forma inespecífica será eliminado por medio del lavado. Durante la incubación con el conjugado, los anticuerpos
anti-IgG humana marcados con peroxidasa se unirán al complejo formado. Finalmente, en la etapa de incubación con el
sustrato cromogénico, laperoxidasa unida al complejo producirá una coloración que permitirá detectar las muestras
reactivas para T. cruzi. La reacción enzimática se detendrá por la adición de ácido sulfúrico, midiéndose luego la intensidad del color en un lector colorimétrico para placas de ELISA.
III) COMPONENTES
Componentes del Test ELISA para Chagas III.
-

2 Placas de ELISA para 96 determinaciones cada una, activadas conuna mezcla de antígenos de T. cruzi. Cada
placa está compuesta por doce tiras de ocho pocillos que pueden ser utilizados individualmente y es suministrada
dentro de un sobre metalizado herméticamente sellado, que contiene un desecante en su interior.

-

6 autoadhesivos para sellar las placas.

-

1 bolsa plástica con cierre hermético para guardar las tiras no utilizadas.

1

Las soluciones quecomponen el kit se detallan en la Tabla I:
Tabla I: componentes del Test ELISA para Chagas III
Solución

Descripción

Color

Conjugado

Dos frascos café con 15 mL de anticuerpo anti-IgG humana conjugado a
peroxidasa. Contiene 0,02% de timerosal como preservante.

Anaranjado

Solución de Lavado 25X

Un frasco con 120 mL de solución amortiguadora salina pH 7,5 concentrada
25 veces.
Contiene 0,02%...