test de parr

 TEST DE PARR
PARR. Las siglas significan lo siguiente:
PCR para Antigen Receptor e Rearrangement que significa PCR para Antígeno y reordenamiento.
En la literatura veterinaria esta técnica fue descrita por primera vez en un estudio preliminar de linfoma canino por Vernau y Moore en 1999, y más tarde por el mismo grupo en el año 2003. Desde entonces, ha sido desarrollado y refinado en unaserie de estudios de investigación como un auxiliar en el diagnóstico de la enfermedad linfoproliferativa canino basado en la detección molecular de una población clonal de linfocitos. Esto ayuda a la prueba en la diferenciación de reactivo (normalmente policlonal) desde neoplásica (generalmente clonal) a población de linfocitos.
Células T y B tienen reordenamientos únicos de la V (D) J regionesde los genes receptores de células T y de células B, respectivamente. Durante la reordenación existe también la adición y la eliminación de un número variable de nucleótidos de ADN dentro de las regiones variables de estos genes, resultando en una gama de longitudes de secuencia de ADN reordenados. Los cebadores se diseñan para unirse a regiones conservadas de los genes y amplificar a través delas regiones variables de la V reorganizado de forma única (D) J segmentos de ADN de linfocitos T y B.
Los productos amplificados (amplicones) se separaran basándose en el tamaño por electroforesis capilar. Aunque, en respuesta a la infección, los linfocitos se pueden seleccionar para la proliferación clonal, en la mayoría de los casos, éstos son el resultado de la reordenación múltiple V (D)J de genes con diferentes adiciones y deleciones de nucleótidos de ADN.
Una muestra de este tipo produce una gama de amplicones de longitud variados, que forman un frotis y tras la separación electroforética debido a la amplia gama de reordenamientos del gen del receptor (policlonales).
Enfermedad linfoproliferativa surge como resultado de la transformación neoplásica de una sola delinfocitos, que tendrá una única V (D) J reordenamientos del gen, que resulta en la proliferación de una población clonal, que en teoría deberían tener la misma única V (D) J genes. Los amplicones producidos a partir de estas células deben ser todas del mismo tamaño y producirían pico distinto o una banda en la electroforesis.
CTDS está utilizando técnicas publicadas para B y T pruebas de clonalidad decélulas en combinación con un conjunto de cebadores de células B novela. La validación inicial de la casa se ha utilizado aproximadamente 80 casos de citología que abarcan linfoma, reactividad linfoide, neoplasias no linfoides y la enfermedad inflamatoria. Suponiendo clonalidad equipara con linfoma resultados iniciales con estas muestras de citología apoyar una sensibilidad para el linfomacanino del 94% y una especificidad del 93%, valores similares a los publicados en otros lugares.
Pruebas de Clonalidad se puede aplicar a preparaciones teñidas de citología, sangre, fluidos, médula ósea, aspirados de tejidos y frotis secados al aire que contienen la población de células anormales (actualmente tejidos fijados con formalina no se analizan de forma rutinaria). La celularidad de lamuestra es importante y, al igual que con muchos informes de terminación de enfermedades infecciosas, un control de ADN del anfitrión se utiliza inicialmente para evaluar la calidad y cantidad de la muestra.
Se recomienda que la evaluación de clonalidad no se utilice como única prueba de diagnóstico, a pesar de que se ejecuta en conjunción con una o más técnicas de diagnóstico incluyendohematología, citología, histopatología, inmunohistoquímica y citometría de flujo. Esto es particularmente importante ya que los resultados falsos positivos son reportados con la inflamación crónica asociada a algunos agentes infecciosos, y la evaluación citológica es útil para asegurar que la población anormal esté presente en la muestra antes del análisis.
En la mayoría de los casos de enfermedades...