Tinció De Gram D’una Colònia Aïllada

1. Objectius
- Observar la morfologia i el tipus de paret dels microorganismes d’una colònia aïllada a través de la tinció de gram i mitjançant un microscopi.

2. Introducció
- Hans ChristianGram (1853-1938) va ser bacterioleg danés que va desarrollar la tinció de gram.
- Amb aquesta tinció es poden diferenciar els bacteris gram positiu i gram negatiu, segons el color que presenten, i laseva morfologia.
- Els grams positiu, tenen un color blau-violat perque retenen el cristall de violeta ja que tenen molts àcids teicoics i pocs lípids. Aquests bacteris, tenen membrana plasmàtica iparet cel•lular.
- Els grams negatiu, es tenyeixen amb la safranina i presenten un color rosa-roig. Tenen dues membranas lipídiques i una paret cel•lular de peptidoglicà entre elles.
- A vegades, podenpresentar grams positius i grams negatius a l’hora.
- Si els cultius són massa vells o les cèl•lules estan massa juntes, es poden donar despostes erroneas.

3. Material
- Microscopi,portaobjectes, cobreobjectes, oli d’immersió.
- Reactiu cristall violeta, lugol, alcohol-acetona (7:3 v/v), fucsina.
- Pipetes Pasteur, encenedor, bec Bunsen, paper secant per netejar l’objecte d’immersió.
-Solució salina fisiològica.
- Guants.

4. Procediment
- Primer de tot, s’ha de netejar el portaobjectes amb aigua i sabó i amb alcohol per desinfectar-lo i s’eixuga fins que no quedi res d’humitat.També s’ha descriure el nom a sobre per saber quina és la part superior i quina la part inferior.
- Amb la nansa de Kolle s’agafa una colònia de les plaques de Petri.
- Sobre el portaobjectes esposa una gota de la solució salina, ni molt grossa ni molt petita.
- S’esterilitza la nansa de Kolle i es passa per sobre el portaobjectes on hi ha la gota.
- Intentant que no es cremi, s’ha depassar el portaobjectes per sobre la flama del bec Bunsen perque l’aigua s’evapori.
- Després d’això, comença la tinció. Primer s’ha de posar cristall violeta a la preparació durant un minut i es neteja...