tinción de gram
Páginas: 7 (1545 palabras)
Publicado: 18 de noviembre de 2013
UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO
FACULTAD DE ODONTOLOGÍA
NOMBRE: CABALLERO OLVERA JUAN DANIEL
FUNDAMENTOS DE LA TINCIÓN DE GRAM Y TÉCNICAS DE MEDIOS DE CULTIVO
PROF. CD VICTOR MANUEL MIRA MORALES
MATERIA: MICROBIOLOGÍA
GRUPO: 2005
Fundamentos de la Tinción de Gram
El método de Gram es la tinción diferencial más importante y la másutilizada en Microbiología. Permite no sólo diferenciar y observar la morfología de la bacterias, sino también clasificarlas, de acuerdo con el color que adquieren después de la tinción, en dos grupos: Grampositivas y Gramnegativas.
La técnica consta de cuatro pasos: en primer lugar, se tiñe la extensión con un colorante básico (cloruro de metilrosanilina, antiguamente violeta de genciana); acontinuación, se adiciona lugol u otro mordiente, con el fin de aumentar la afinidad entre la célula y el colorante; en una tercera fase, se decolora con alcohol acetona; y, por último, se tiñe con safranina o fucsina, que actúan como colorantes de contraste.
Las bacterias Grampositivas logran retener el colorante inicial, a pesar de la decoloración, y aparecen de color violeta oscuro. LasGramnegativas se descoloran, y son rojas por el colorante de contraste.
El tamaño de la mayoría de las células bacterianas es tal que resultan difíciles de ver con el
microscopio óptico. La principal dificultad es la falta de contraste entre la célula y el medio
que la rodea, y el medio más simple de aumentar el contraste es la utilización de colorantes.
Estos pueden emplearse para distinguirentre tipos diferentes de células o para revelar la
presencia de determinados constituyentes celulares, tales como flagelos, esporas, cápsulas,
paredes celulares, centros de actividad respiratoria, etc.
Las células generalmente son tratadas para coagular el protoplasma antes de teñirlas,
proceso llamado fijación. Para bacterias, la fijación por el calor es lo más corriente, aunquetambién puede fijarse con sustancias químicas como formaldehido, ácidos y alcoholes.
Después de la fijación, si se añade el colorante, no se producen ulteriores cambios estructurales en el protoplasma. La fijación se realiza habitualmente en células que han sido
fijadas sobre un portaobjetos, tratando después éste con el agente fijador, y siguiendo
inmediatamente el proceso de tinción. La fijaciónproduce habitualmente el encogimiento de las células; la tinción, por el contrario, hace que las células aparezcan mayores que lo que son realmente, de manera que las medidas de las células que han sido fijadas o teñidas no pueden realizarse con mucha precisión.
La mayoría de los colorantes son compuestos orgánicos que tienen alguna afinidad específica por los materiales celulares. Muchoscolorantes utilizados con frecuencia son moléculas cargadas positivamente (cationes) y se combinan con intensidad con los constituyentes celulares cargados negativamente, tales como los ácidos nucleicos y los polisacáridos ácidos.
Ejemplos de colorantes catiónicos son el azul de metileno, el cristal violeta y la safranina.
Otros colorantes son moléculas cargadas negativamente (aniones) y secombinan con los
constituyentes celulares cargados positivamente, tales como muchas proteínas. Esos
colorantes incluyen la eosina, la fucsina ácida y el rojo Congo.
Otro grupo de colorantes son sustancias liposolubles; los colorantes de este grupo se combinan con los materiales lipídicos de la célula, usándose a menudo para revelar la localización de las gotas o depósitos de grasa. Unejemplo de colorante liposoluble es el negro Sudán.
Algunos colorantes teñirán mejor sólo después de que la célula haya sido tratada con otra
sustancia química, que no es un colorante por sí mismo. Esta sustancia se denomina
mordiente; un mordiente habitual es el ácido tánico. El mordiente se combina con un
constituyente celular y lo altera de tal modo que ahora sí podrá atacar el...
FACULTAD DE ODONTOLOGÍA
NOMBRE: CABALLERO OLVERA JUAN DANIEL
FUNDAMENTOS DE LA TINCIÓN DE GRAM Y TÉCNICAS DE MEDIOS DE CULTIVO
PROF. CD VICTOR MANUEL MIRA MORALES
MATERIA: MICROBIOLOGÍA
GRUPO: 2005
Fundamentos de la Tinción de Gram
El método de Gram es la tinción diferencial más importante y la másutilizada en Microbiología. Permite no sólo diferenciar y observar la morfología de la bacterias, sino también clasificarlas, de acuerdo con el color que adquieren después de la tinción, en dos grupos: Grampositivas y Gramnegativas.
La técnica consta de cuatro pasos: en primer lugar, se tiñe la extensión con un colorante básico (cloruro de metilrosanilina, antiguamente violeta de genciana); acontinuación, se adiciona lugol u otro mordiente, con el fin de aumentar la afinidad entre la célula y el colorante; en una tercera fase, se decolora con alcohol acetona; y, por último, se tiñe con safranina o fucsina, que actúan como colorantes de contraste.
Las bacterias Grampositivas logran retener el colorante inicial, a pesar de la decoloración, y aparecen de color violeta oscuro. LasGramnegativas se descoloran, y son rojas por el colorante de contraste.
El tamaño de la mayoría de las células bacterianas es tal que resultan difíciles de ver con el
microscopio óptico. La principal dificultad es la falta de contraste entre la célula y el medio
que la rodea, y el medio más simple de aumentar el contraste es la utilización de colorantes.
Estos pueden emplearse para distinguirentre tipos diferentes de células o para revelar la
presencia de determinados constituyentes celulares, tales como flagelos, esporas, cápsulas,
paredes celulares, centros de actividad respiratoria, etc.
Las células generalmente son tratadas para coagular el protoplasma antes de teñirlas,
proceso llamado fijación. Para bacterias, la fijación por el calor es lo más corriente, aunquetambién puede fijarse con sustancias químicas como formaldehido, ácidos y alcoholes.
Después de la fijación, si se añade el colorante, no se producen ulteriores cambios estructurales en el protoplasma. La fijación se realiza habitualmente en células que han sido
fijadas sobre un portaobjetos, tratando después éste con el agente fijador, y siguiendo
inmediatamente el proceso de tinción. La fijaciónproduce habitualmente el encogimiento de las células; la tinción, por el contrario, hace que las células aparezcan mayores que lo que son realmente, de manera que las medidas de las células que han sido fijadas o teñidas no pueden realizarse con mucha precisión.
La mayoría de los colorantes son compuestos orgánicos que tienen alguna afinidad específica por los materiales celulares. Muchoscolorantes utilizados con frecuencia son moléculas cargadas positivamente (cationes) y se combinan con intensidad con los constituyentes celulares cargados negativamente, tales como los ácidos nucleicos y los polisacáridos ácidos.
Ejemplos de colorantes catiónicos son el azul de metileno, el cristal violeta y la safranina.
Otros colorantes son moléculas cargadas negativamente (aniones) y secombinan con los
constituyentes celulares cargados positivamente, tales como muchas proteínas. Esos
colorantes incluyen la eosina, la fucsina ácida y el rojo Congo.
Otro grupo de colorantes son sustancias liposolubles; los colorantes de este grupo se combinan con los materiales lipídicos de la célula, usándose a menudo para revelar la localización de las gotas o depósitos de grasa. Unejemplo de colorante liposoluble es el negro Sudán.
Algunos colorantes teñirán mejor sólo después de que la célula haya sido tratada con otra
sustancia química, que no es un colorante por sí mismo. Esta sustancia se denomina
mordiente; un mordiente habitual es el ácido tánico. El mordiente se combina con un
constituyente celular y lo altera de tal modo que ahora sí podrá atacar el...
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