Tinción de Gram

La tinción de Gram es una técnica que ayuda a la diferenciación de bacterias. Esta técnica de tinción se lleva a cabo con Cristal violeta, Yodo lugol, Alcohol-cetona y finalmente por Safranina. Pararealizar la tinción, primero que nada, se tiene que realizar un frotis, después cada sustancia antes mencionada se tiene que ir poniendo uno a uno (En el orden ya mencionado) durante 1 minuto,excepto el Alcohol-Cetona, que se aplica por 3 minutos ésto, para que si es Gram -, se quite por completo el complejo formado por el cristal violeta y el yodo lugol.
La diferencia que se observa en laresistencia a la decoloración, es debido a que la membrana externa de las Gram negativas es soluble en solventes orgánicos, como por ejemplo la mezcla de alcohol/acetona. La capa de peptidoglicano queposee es demasiado delgada como para poder retener el complejo de cristal violeta/yodo que se formó previamente, y por lo tanto este complejo se escapa, perdiéndose la coloración azul-violácea. Pero porel contrario, las Gram positivas, al poseer una pared celular más resistente y con mayor proporción de peptidoglicanos, no son susceptibles a la acción del solvente orgánico, sino que este actúadeshidratando los poros cerrándolos, lo que impide que pueda escaparse el complejo cristal violeta/yodo, y manteniendo la coloración azul-violácea.
Un microorganismo gram positivo debe presentar una paredcelular sana. El mismo microorganismo, si sufre daño de la pared por una u otra causa, se vuelve gram negativo. Esto indica la importancia de la pared para la retención o el escape del colorante. Unaposible teoría del mecanismo de tinción es la siguiente: El colorante básico entra al microorganismo, donde forma con el yodo una laca insoluble en agua. El alcohol o la acetona empleados paraaclarar, deshidratan las paredes de los microorganismos gram positivos, tratados con mordiente, y forma una barrera que la laca no puede atravesar. En las células gram negativas, los lípidos de la pared...