Tinción De Ziehl-Neelsen

TINCIÓN DE ZIEHL-NEELSEN
Principio:
La tinción de Ziehl-Neelsen es una coloración diferencial útil en la identificación de
Micobacterias, aunque no permite la diferenciación de distintas especies.La característica de
ácido-resistencia de estos microorganismos hace de esta coloración un método rápido en el
diagnóstico, presuntivo, de infección micobacteriana. Las micobacterias soncoloreadas de rojo
por la Fucsina y retienen el color a pesar de la acción del ácido y del alcohol.

Procedimiento:
1. La muestra puede extenderse directamente en el portaobjetos o bien concentrarla yexaminar
el sedimento.
2. Se prepara el frotis de forma habitual y se fija por calor o con Metanol (Reag. Ph. Eur.)
PA-ACS-ISO (cód. 131091). El portaobjetos que debe contener la preparación debeser nuevo
o extremadamente limpio.
3. Cubrir la preparación con Fucsina Básica Fenicada solución según Ziehl DC (cód. 251333) y
calentar hasta observar emisiones de vapor pero evitando laebullición. Mantener caliente la
preparación de 10 a 15 minutos.
4. Lavar con agua.
5. Decolorar con Alcohol-Clorhídrico 8:2 DC (cód. 251804) durante 1 minuto aproximadamente o
bien hasta que ya noaparezca un color rojo, a continuación lavar con agua.
6. Realizar una tinción de contraste con Azul de Metileno Fenicado DC (cód. 251172) de 3 a 4
minutos.
7. Lavar de nuevo con agua, secar al aire yobservar con objetivo de inmersión.

Resultados:
• Los microorganismos teñidos con el primer colorante (Fucsina) de rosa o rojo son los ácidoresistentes, presuntivamente micobacterias. Los otrosorganismos o células de la tinción son
de color azul.
• Esta tinción también tiñe otros microorganismos no necesariamente patógenos, por lo que,
para una confirmación positiva de la presencia de M.tuberculosis, es necesario realizar un
cultivo en un medio selectivo.











TINCION DE GRAM
OBJETIVOS:
1. Iniciación en las técnicas del estudio de microorganismos: cultivo,...