Tincion bacteriana simple

I. Introducción:

Un colorante biológico es una molécula que es capaz de unirse a una estructura se la célula y darle color. Los colorantes se emplean también en la constitución de los medios de cultivo, como indicadores o como inhibidores.

En microbiología, las coloraciones tienen diferentes objetivos: demostrar los microorganismos y algunas otras células en diferentes especímenes: poner demanifiesto algunas características morfológicas y estructuras microbianas tales como; esporas, flagelos, gránulos, capsulas, etc., y diferenciar los microorganismos según su comportamiento tintorial.

II. Objetivos:

a. Observar las diferentes formas, tamaños y agrupaciones que presentan los microorganismos aplicando un método simple de tinción

III. Materiales y Métodosa. Materiales

• Laminas fijadas de microorganismo

• Aceite de inmersión

• Colorantes básicos:

o Azul de metileno

o Cristal violeta

o Carbolfucsina

• Papel secante

• Piseta de agua

• Soporte para tinción

• Asa de kolle

• Muestra conteniendo bacterias

• Lamina porta objeto

• Mechero dealcohol

b. Procedimiento

• Coloque las laminas fijadas de microorganismo sobre el soporte para tinción

• Agregue 5 o gotas de cada colorante dejando que actúen por un tiempo de 2 minutos para el azul de metileno, 30 segundos para el cristal violeta, y 10 segundos para la carbolfucsina

• Una vez cumplido el tiempo para los colorantes, lave cada lamina con la piseta deagua

• Seque las laminas al aire o dentro de papel secante

• Examine las preparaciones teñidas bajo el objetivo de inmersión (100 – 150x) de un microscopio compuesto

• Elabore esquemas de sus observaciones destacando las diferencias en tamaño, forma y agrupaciones que se presenten.

IV. Resultados:

|Bacteria |Colorante |Tiempo Exposición|Grafico |
|Escherichia Coli |Fucsina |10” |[pic] |
|Bacillus sp |Cristal Violeta |30” |[pic] |
|Staphylococcus Aureus |Cristal Violeta |30” |[pic]|
|Staphylococcus Aureus |Azul de Metileno |2´ |[pic] |

• Material Fotográfico:

|Bacteria |Agrupación |Forma |Imagen grado de aumento 1000x |
|Escherichia Coli |No especifica|Coco bacilo, semi alargada |[pic] |
|Bacillus sp |Estreptobacillus, en cadena |Bacilo, alargadas |[pic] |
|Staphylococcus Aureus |Staphylococcus, en racimos |Cocos, circulares |[pic] |
|Staphylococcus Aureus|Staphylococcus, en racimos |Cocos, circulares |[pic] |

V. Discusión Resultados:

➢ Las bacterias están cargadas negativamente por la presencia de ácidos ribonucleicos, en los ribosomas (A. Morello, A. Granato, Eckel Mizer), lo cual las hace buenos receptores para los colorantes básicos cargados positivamente.

➢ SegúnMartínez de Tejada (1999), es sumamente importante no excederse al calentamiento de la muestra sobre el portaobjetos para que las bacterias no se deformen ni se rompan. Es por ello que la muestra teñida por Cristal Violeta fue la que mejor se visualizó en el microscopio, ya que se hizo un correcto calentamiento de la muestra.

➢ El tiempo necesario de fijación del colorante es diferente en...