Tincion de Gram-Bacterias Gram Positivas y Gram Negativas
DEL ESTADO DE NAYARIT
Producción Industrial de Alimentos
2° “F”
Maestra: Magdalena Cruz López
Alumna: Mitzunary Dayanira Flores Ruiz“Investigacion”
27 de mayo de 2013
La tinción de Gram es una técnica diferencial comúnmente empleada en el diagnóstico microbiológico, fue descubierta por Hans Christian Gram en1884. La mayor parte de las muestras sometidas a examen cuando se sospecha infección bacteriana deben ser extendidas en frotis sobre laminillas de vidrio, teñidas y examinadas en el microscopio. Losreactivos empleados en la tinción de Gram son el cristal violeta (colorante básico), lugol (mordiente), alcohol cetona (decolorante) y safranina (colorante de contraste).
El cristal violeta sirve comocolorante básico uniéndose a la pared celular bacteriana, con ayuda del mordiente (lugol) que refuerza la unión del colorante. Las bacterias Gram positivas, debido a la estructura y composiciónbioquímica de su pared celular, retienen el complejo cristal violeta-lugol y aun después del tratamiento con el decolorante conserva el colorante básico, por lo que se observan de color púrpura o violeta almicroscopio. Las bacterias Gram negativas pierden el colorante básico cuando son tratadas con el decolorante debido a que el alcohol disuelve el contenido lipídico de la pared celular (lo que aumenta lapermeabilidad celular), dando como resultado la pérdida del complejo cristal violeta-lugol. Las bacterias decoloradas captan entonces el colorante de contraste, razón por la cual estas bacterias seobservan de color rojo al microscopio.
Equipo
Microscopio óptico
Materiales
Mechero de Bunsen
Asa bacteriológica
Portaobjetos
Varillas de vidrio (soporte)
Pizeta
GasasReactivos
Cristal violeta
Solución de lugol
Alcohol acetona
Safranina
Aceite de inmersión
Técnica
1.
2. Limpiar el portaobjetos con gasas y encender el mechero. Colocar una...
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