Tincion De Gram Flora Humana
Páginas: 6 (1321 palabras)
Publicado: 22 de octubre de 2012
geraldine arevalo
tecnologo control decalidad de alimentos
aprendiz sena
Estudio morfológico de bacterias
Tinción de Gram
PRESENTADO POR:
Geraldine Arévalo Guayacundo
Andrea Carolina Góngora
Juan Carlos Barajas
Lina Paola Espitia
Jessica Andrea López
149641-02
PRESENTADO A:
Juan Guillermo Cubillos Hinojosa
CENTRONACIONAL DE HOTELERIA, TURISMO Y ALIMENTOS
REGIONAL, DISTRITO CAPITAL
BOGOTÁ, FEBRERO DE 2012
INTRODUCCIÓN
Se encuentran métodos sencillos para la identificación de los microorganismos
que pueden haber sido aislados; la identificación completa puede requerir otras pruebas, teniendo en cuenta que para proceder a la identificación debe partirse siempre de un cultivo puro, o por lo menosde una colonia aislada.
Debe tenerse siempre en cuenta la diversidad que presentan los microorganismos, que hace que una cepa en concreto no presente exactamente las características que definen a la especie. Por tanto, hay que considerar la totalidad de los resultados coinciden y/o no coinciden, y valorar la importancia taxonómica o morfológica de cada uno, las baterías son transparentes porlo que se hace muy complicado poder identificarlas por esta razón se realiza la tinción de Gram la cual las clasifica sobre la base de sus morfologías celulares, tamaños y formas.
OBJETIVOS
• Aprender adecuadamente el procedimiento para la tinción de Gram.
• Distinguir y/o diferenciar las bacterias Gram positivas de lasGram negativas.
• Comprender su importancia y utilidad.
MATERIALES Y METODOS
El método de tinción que se usa universalmente para distinguir a las bacterias en dos grandes grupos: se trata de la Tinción de Gram. Es una tinción diferencial que basa su distinción en la estructura diferente de la pared bacterianade las bacteria Gram + (pared más gruesa, y una sola capa de peptidoglucano) y de las Gram- (pared más delgada y dividida en dos partes). El procedimiento y sustancias usadas son:
*Colorante básico Cristal Violeta o Violeta de Genciana. Es el primer colorante que se aplica sobre el frotis previamente preparado. Es un colorante selectivo que tiñe a todos los microorganismos. Se deja actuardurante un minuto y se lava con agua a continuación.
*Lugol. Producto compuesto de yodo y yoduro potásico. Es un mordiente, que intensifica al Cristal Violeta haciendo que precipite. Se deja actuar un minuto y se lava con alcohol, el tiempo justo para que no se arrastre el colorante del todo.
*Alcohol 96º. El alcohol retira el colorante de las Gram- debido a su diferente estructura de la paredcelular (tamaño de los poros).
*Safranina. Colorante básico diferenciador. Tiñe a las bacterias Gram-. Se deja actuar treinta segundos y se lava con agua.
Una vez finalizada la tinción las bacterias gran- estarán teñidas de un color rosáceo, y las Gram+ de un color violeta. Esto sirve para diferenciarlas claramente al microscopio óptico.
El cristal violeta (colorante catatónico) penetra entodas las células bacterianas (tanto Gram positivas como Gram negativas) a través de la pared bacteriana. El lugol es un compuesto formado por yodo en equilibrio con yoduro de potasio el cual está presente para solubilizar el yodo, y actúa de mordiente, haciendo que el cristal violeta se fije con mayor intensidad a la pared de la célula bacteriana. El I2 entra en las células y forma un complejoinsoluble en solución acuosa con el cristal violeta.
La mezcla de alcohol-acetona que se agrega, sirve para realizar la decoloración, ya que en la misma es soluble el complejo I2/cristal violeta. Los organismos Gram positivos no se decoloran, mientras que los Gram negativos sí lo hacen.
Para poner de manifiesto las células Gram negativas se utiliza una coloración de contraste. Habitualmente es un...
tecnologo control decalidad de alimentos
aprendiz sena
Estudio morfológico de bacterias
Tinción de Gram
PRESENTADO POR:
Geraldine Arévalo Guayacundo
Andrea Carolina Góngora
Juan Carlos Barajas
Lina Paola Espitia
Jessica Andrea López
149641-02
PRESENTADO A:
Juan Guillermo Cubillos Hinojosa
CENTRONACIONAL DE HOTELERIA, TURISMO Y ALIMENTOS
REGIONAL, DISTRITO CAPITAL
BOGOTÁ, FEBRERO DE 2012
INTRODUCCIÓN
Se encuentran métodos sencillos para la identificación de los microorganismos
que pueden haber sido aislados; la identificación completa puede requerir otras pruebas, teniendo en cuenta que para proceder a la identificación debe partirse siempre de un cultivo puro, o por lo menosde una colonia aislada.
Debe tenerse siempre en cuenta la diversidad que presentan los microorganismos, que hace que una cepa en concreto no presente exactamente las características que definen a la especie. Por tanto, hay que considerar la totalidad de los resultados coinciden y/o no coinciden, y valorar la importancia taxonómica o morfológica de cada uno, las baterías son transparentes porlo que se hace muy complicado poder identificarlas por esta razón se realiza la tinción de Gram la cual las clasifica sobre la base de sus morfologías celulares, tamaños y formas.
OBJETIVOS
• Aprender adecuadamente el procedimiento para la tinción de Gram.
• Distinguir y/o diferenciar las bacterias Gram positivas de lasGram negativas.
• Comprender su importancia y utilidad.
MATERIALES Y METODOS
El método de tinción que se usa universalmente para distinguir a las bacterias en dos grandes grupos: se trata de la Tinción de Gram. Es una tinción diferencial que basa su distinción en la estructura diferente de la pared bacterianade las bacteria Gram + (pared más gruesa, y una sola capa de peptidoglucano) y de las Gram- (pared más delgada y dividida en dos partes). El procedimiento y sustancias usadas son:
*Colorante básico Cristal Violeta o Violeta de Genciana. Es el primer colorante que se aplica sobre el frotis previamente preparado. Es un colorante selectivo que tiñe a todos los microorganismos. Se deja actuardurante un minuto y se lava con agua a continuación.
*Lugol. Producto compuesto de yodo y yoduro potásico. Es un mordiente, que intensifica al Cristal Violeta haciendo que precipite. Se deja actuar un minuto y se lava con alcohol, el tiempo justo para que no se arrastre el colorante del todo.
*Alcohol 96º. El alcohol retira el colorante de las Gram- debido a su diferente estructura de la paredcelular (tamaño de los poros).
*Safranina. Colorante básico diferenciador. Tiñe a las bacterias Gram-. Se deja actuar treinta segundos y se lava con agua.
Una vez finalizada la tinción las bacterias gran- estarán teñidas de un color rosáceo, y las Gram+ de un color violeta. Esto sirve para diferenciarlas claramente al microscopio óptico.
El cristal violeta (colorante catatónico) penetra entodas las células bacterianas (tanto Gram positivas como Gram negativas) a través de la pared bacteriana. El lugol es un compuesto formado por yodo en equilibrio con yoduro de potasio el cual está presente para solubilizar el yodo, y actúa de mordiente, haciendo que el cristal violeta se fije con mayor intensidad a la pared de la célula bacteriana. El I2 entra en las células y forma un complejoinsoluble en solución acuosa con el cristal violeta.
La mezcla de alcohol-acetona que se agrega, sirve para realizar la decoloración, ya que en la misma es soluble el complejo I2/cristal violeta. Los organismos Gram positivos no se decoloran, mientras que los Gram negativos sí lo hacen.
Para poner de manifiesto las células Gram negativas se utiliza una coloración de contraste. Habitualmente es un...
Leer documento completo
Regístrate para leer el documento completo.