tincion de gram

PRACTICA 2
Tinción de Gram

Introducción
Las bacterias son incoloras y se observan con dificultad al microscopio óptico. Los cocos y los bacilos se pueden identificar por su forma, agrupacióny por la afinidad a los colorantes utilizados en la tinción de Gram. Las bacterias Gram positivas retienen el color azul violeta y las bacterias Gram negativas el color rojo pálido. En general latinción de Gram no es aplicable a otros microorganismos como protozoos y hongos, exceptuando a las levaduras que se tiñen como Gram positivas.

Objetivos
1. Clasificar algunas especies bacterianas enGram positivas o Gram negativas de acuerdo a esta tinción.
Materiales de laboratorio por equipo
1 Asa bacteriológica de aro
Fucsina
1 Microscopio
Cristal violeta
2 Mecheros
Lugol
6Portaobjetos y cubreobjetos
Alcohol-cetona
Cultivos bacterianos
Papel para lente
Aceite de inmersión
Pinzas para tubo de ensaye
Cronómetro

Material del equipo
Cerillos
Colores
Marcador indelebleo lápiz graso
Cloro
Franela

Actividad de la práctica
Preparación del frotis
Se realizará el mismo procedimiento de la práctica 2

Fijación del frotis
Se realizará el mismo procedimientode la práctica 2

Tinción diferencial de Gram.
1. Cubrir el frotis con dos gotas de cristal violeta durante 30 segundos a 1 minuto.
2. Lavar cuidadosamente el frotis con agua de la llave odestilada para eliminar el exceso de colorante.
3. Sacudir un poco y dejar secar, cubrir el frotis con dos gotas de lugol por 30 segundos.
4. Repetir el paso 2
5. Inclinar el portaobjeto y aplicar gota agota el decolorante dejando que escurra hasta que no fluya más tintura.
6. inmediatamente repetir el paso 2.
7. aplicar dos gotas de safranina durante 30 segundos.
8. repetir el paso 2, eliminarcuidadosamente el exceso de agua con una toalla de papel y dejar secar al aire.
9. observar al microscopio.









Resultados.
Reportar las observaciones de forma, agrupación color y...