tincion de gram

Páginas: 2 (401 palabras) Publicado: 28 de abril de 2013
Objetivo: identificar morfología cocos, estreptococos, etc. Tipo de tinción (Gram positivas o negativas) de la saliva.
Marco teórico.
La tinción de Gram es una técnica diferencial comúnmenteempleada en el diagnóstico microbiológico, fue descubierta por Hans Christian Gramen 1884. La mayor parte de las muestras sometidas a examen cuando se sospecha infección bacteriana deben ser extendidas enfrotis sobre laminillas de vidrio, teñidas y examinadas en el microscopio Los reactivos empleados en la tinción de Gram son el cristal violeta (colorante básico), lugol (mordiente) ,alcohol cetona(decolorante) y safranina (colorante de contraste).
El cristal violeta sirve como colorante básico uniéndose a la pared celular bacteriana, con ayuda del mordiente (lugol) que refuerza la unión delcolorante. Las bacterias Gram positivas, debido a la estructura y composición bioquímica de su pared celular retienen el complejo cristal violeta-lugol y aun después del tratamiento con el decoloranteconserva el colorante básico, por lo que se observan de color púrpura o violeta al microscopio. Las bacterias Gram negativas pierden el colorante básico cuando son tratadas con el decolorante debido aque el alcohol disuelve el contenido lipídico de la pared celular (lo que aumenta la permeabilidad celular), dando como resultado la pérdida del
Material:
• Microscopio óptico
• Mechero de busen• Asa calibrada
• Portaobjetos
Reactivos:
• Cristal violeta
• Lugol
• Alcohol acetona
• Safranina

Técnica:
1- Muestra
2- Agregar solución salina ( 1 gota)
3- Secar o fijar con flama almechero
4- Entintar con cristal violeta (1 min)
5- Lavar con agua
6- Decolorar con alcohol-cetona ( 5 - 15 seg)
7- Lavar con agua
8- Cubrir con safranina (1 min)
9- Lavar con agua
10- Secar alaire y observar.

Observaciones
Observamos en la primera muestra que no eran tan visibles, solo eran pequeñas marcas, en la segunda muestra comenzaron a aparecer más bacterias, con un poco más de...
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