tincion de gram

“TINCION DE GRAM”
INTRODUCCION
Algunos microorganismos, como en el caso de las bacterias, son utilizados para cultivos, estos cultivos son a su vez utilizados para diferentes propósitos, algunos de ellos incluyen el aislamiento de ciertos tipos de bacterias, el mantenimiento de los cultivos para su uso posterior, e incluso para facilitar el reconocimiento especifico de algún tipo de bacteria,además del estudio de sus características celulares. El primer paso para lograr un cultivo exitoso es la selección adecuada de un medio de cultivo, existen en la actualidad muchos medios de cultivos los cuales pueden ser clasificados en: selectivos, diferenciales, selectivo-diferenciales y de mantenimiento, aunque existen muchos otros (Rodríguez, et al. 2006).
Una forma de analizar losmicroorganismos que proliferan en los medios de cultivo es a través de una toma de muestras de los cultivos que requieren ser observadas bajo el microscopio, aunque, dado que las bacterias tienen poco contraste con su entorno muchas veces es necesario teñir las para aumentar lo. Existen también diversos tipos de tinciones; Simples, diferenciales, negativas, de estructura microbiana, y de materiales dereserva (Rodríguez, et al. 200
Dentro de los tipos de tinciones más utilizadas en los laboratorios de bacteriología, se encuentra, la tinción de gram, la cual fue desarrollada por el doctor Christian Gram en 1984, esta permite, de acuerdo con la estructura de la pared bacteriana, agrupar a las bacterias en gram(+) positivas y gram(-) negativas, aunque, se presentan algunas excepciones, esto debido aque algunas se clasifican como gram variable, puesto que presentan simultáneamente la tinción positiva y negativa, aun cuando sean cultivadas bajo condiciones optimas. Esta peculiaridad es debido a la estructura de de la pared celular que presenta, la cual es positiva pero la capa de péptidoglicano es más delgada. Esta técnica de tinción también se encuentra relacionada con otras propiedades,como las endotoxinas, susceptibilidad a antibióticos, sensibilidad o resistencia a sales biliares, punto isoeléctrico, y tinción superficial (Rodríguez, et al. 2006, García V., 2004).
OBJETIVO GENERAL.
Entender la función de distintos colorantes sobre las paredes celulares de algunos organismos, así como, conocer los fundamentos básicos para la realización de la tinción de gram.
OBJETIVOSPARTICULARES.
Conocer de cerca la siembra de un cultivo de bacterias en cajas de petri.
Aprender a realizar extendidos o frotis bacterianos, y de igual modo conocer y comprender el método de fijación por calor.
Aprender a emplear la tinción de diferencial de gram.
METODOLOGIA
En una placa de petri con agar nutritivo previamente elaborado, Se sembró bacterias de E coli, con ayuda de una azabacteriana se hiso un frotis con una aza bacteriana y se resembro en forma de a un agar nutritivo la ase introdujo a la incubadora ayuda a 37°c por un periodo aproximado de 24 hrs.
De la misma sepa que se utilizo para sembrar, se tomo una muestra, a través se realizo un frotis en espiral, se coloco la muestra en un portaobjetos con agua. Y se fijo utilizando un mechero. Después se procedió a latinción
Primero, se cubrieron ambas muestras con violeta cristal durante un minuto, y fueron enjuagadas con agua.
Luego, se agregó lugol sobre las muestras, también durante un minuto, el cual se enjuago con alcohol-cetona, después del minuto transcurrido, por no más de 20 segundos.
Finalmente se agrego safranina durante 20 segundos, y se enjuago con agua. Se observo al microscopio
RESULTADOSFig. 1, 2 y 3. Muestras obtenidas al relizar algunos frotis y someterlas a tinción de Gram, correspondientes a la muestra/cultivo patrón. En la muestra se pueden observar una gran cantidad de bacterias fijadas que adquirieron una tonalidad rosada, lo que permite concluir que los organismos pertenecen al grupo de bacterias Gram –.

Figura 2. Muestras obtenidas al analizar los cultivos a...