Tincion De Gram
TINCION DE GRAM
La tinción de Gram o coloración de Gram es una técnica q se utiliza más comúnmente en muestras clínicas y es un tipo de tinción diferencial usadoen microbiología.
La tinción es una técnica utilizada en el laboratorio para definir o diferenciar las Bacterias Gram positivas de las Bacterias Gram negativas.
El encargado de desarrollar estatécnica fue el bacteriólogo danés Christian Gram en 1884 para poder tener referencia en las células bacterias como su morfología y para poder tener una diferenciación de estas.
Tomo como referencia losiguiente: las bacterias que en el proceso de tinción se teñían de morado o azul eran las bacterias Gram positivas y las que se teñían de rojo o rosa eran las bacterias Gram negativas.
La metodologíaque se sigue es la siguiente:
* Recoger muestras.
* Hacer el extendido en espiral.
* Dejar secar a temperatura ambiente.
* Fijar la muestra con metanol durante un minuto o al calor(flameado 3 veces aprox.)
* Agregar azul violeta (cristal violeta o violeta de genciana) y esperar 1 min. Todas las células Gram positivas y Gram negativas se tiñen de color azul-purpura.
*Enjuagar con agua.
* Agregar lugol y esperar entre 1 minuto.
* Enjuagar con agua.
* Agregar acetona y/o alcohol y esperar 4 segundos (parte critica de la coloración)
* Enjuagar con agua.* Tinción de contraste agregando safranina o fucsina básica y esperar 1-2 min Este tinte dejará de color rosado-rojizo las bacterias Gram negativas.
* Enjuagar con agua.
Para observar almicroscopio óptico es conveniente hacerlo a 100x con aceite de inmersión.
REFERENCIA: Aulton Michael E., Ciencia y diseño de formas farmacéuticas, 2° edición, Ed. Elsevier España, 2004.
El cristalvioleta que es el colorante penetra a las bacterias Gram tanto positivas como negativas atravesando su pared bacteriana.
También es necesario un compuesto q se utiliza para que el cristal violeta se...
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