Tincion De Gram
I. OBJETIVOS.
• Identificar las diferentes morfologías bacterianas mediante la observación microscópica como primer parámetro deidentificación microbiológica
• .
• Realizar coloraciones simples y diferenciales mediante las técnicas convencionales de tinciones bacterianas para una caracterización celular adecuada.
• Adquirirdestreza en la diferenciación de bacterias Gram positivas y Gram negativas mediante la tinción de Gram.
II. FUNDAMENTO TEORICO:
1. FROTIS FIJOS Y TEÑIDOS:
Para observar las característicasmorfológicas de las bacterias se usan las preparaciones fijas y teñidas que nos permiten observar las estructuras típicas de estos microorganismos en el microscopio, por cuanto los colorantes penetranen las diversas estructuras, coloreándolas y haciéndolas visibles con mayor claridad.
Fijar la muestra en el portaobjetos nos permite tener una muestra sin movimiento celular, es decir, las célulasa observar ya no se pueden mover y por tanto las podemos observar en un solo lugar de la placa que montamos.
Los pasos esenciales en la preparación de un frotis fijo y teñido son los siguientes:- Hacer el frotis o extendido
- Fijar la muestra
- Aplicar la tinción correspondiente.
2. COLORACIONES.
Para teñir los microorganismos e dispone de un gran número de compuestos orgánicoscoloreados (colorantes). En general son un tanto complejos en su estructura molecular. Una clasificación práctica de estos compuestos es de acuerdo a su comportamiento químico, es decir, ácido, básico yneutro. Un colorante básico es aquel donde la carga neta del ión colorante es positiva; uno ácido es aquel cuya carga neta del ión colorante es negativa y uno neutro las cargas están en equilibrio.En general los colorantes ácidos tiñen a los componentes celulares básicos y los colorantes básicos tiñen los componentes celulares ácidos.
3. COLORACIONES SIMPLES.
Las coloraciones simples...
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