Tincion De Gram

La tinción de Gram o coloración de Gram es un tipo de tinción diferencial empleado en microbiología para la visualización de bacterias, sobre todo en muestras clínicas. Debe sunombre al bacteriólogo danés Christian Gram, que desarrolló la técnica en 1884. Se utiliza tanto para poder referirse a la morfología celular bacteriana como para poder realizar unaprimera aproximación a la diferenciación bacteriana, considerándose Bacteria Gram positiva a las bacterias que se visualizan de color moradas y Bacteria Gram negativa a las que sevisualizan de color rosa o rojo o grosella.
La tinción de Gram utiliza en orden estricto de primero a cuarto los siguientes reactivos:
1 Cristal Violeta o violeta de Genciana: COLORANTEBÁSICO
2 Lugol de Gam: MORDIENTE
3 Alcohol-Acetona: DECOLORANTE
4Fuscina (Safranina): COLORANTE DE CONTRASTE
FUNDAMENTO: El cristal violeta sirve como colorante básicouniéndose a la pared celular bacteriana, con la ayuda del mordiente que refuerza la unión del colorante.
La bacterias GRAM POSITIVAS debido a la estructura y composición bioquímica de supared celular retienen el complejo cristal violeta-lugol y aun después del tratamiento con el decolorante conserva el colorante básico, por lo que se observan al microscopio de colorazul oscuro o violeta una vez concluida la técnica de tinción.
Las bacterias GRAM NEGATIVAS pierden el colorante básico cuando son tratadas con el decolorante debido a que el alcoholdisuelve el contenido lipídico de la pared celular lo que aumenta la permeabilidad celular, dando como resultado la perdida del complejo cristal violeta-lugol. Las bacteriasdecoloradas captan entonces el colorante de contraste, razón por la cual estas células bacterianas se observan al microscopio de color rosado una vez concluida la técnica de tinción.