Tincion de ziehl neelsen
Fundamento
Las paredescelulares de ciertos parásitos y bacterias contienen ácidos grasos (ácidos micólicos) de cadena larga (50 a 90 átomos de carbono) que les confieren la propiedad de resistir la decoloracíón conalcohol-ácido, después de la tinción con colorantes básicos. Por esto se denominan ácido-alcohol resistentes. Las micobacterias como M. tuberculosis y M. marinum y los parásitos coccídeos comoCryptosporidium se caracterizan por sus propiedades de ácido-alcohol resistencia. La coloración clásica de Ziehl-Neelsen requiere calentamiento para que el colorante atraviese la pared bacteriana que contieneceras. Al suspender el calentamiento y enfriar con agua, provoca una nueva solidificación de lo ácidos grasos de modo que el colorante ya no puede salir de las bacterias. Por otro lado, el calentamientoaumenta la energía cinética de las moléculas del colorante lo cual también facilita su entrada a las bacterias. Las bacterias que resisten la decoloración son de color rojo y la que no se ven de colorazul, ya que se utiliza azul de metileno como tinción de contraste
El procedimiento es el siguiente:
1. desparafinar e hidratar los cortes
2. ácido periódico 5%, 10 min
3. lavar conagua destilada
4. fucsina fenicada, 15 min
5. decolorar en alcohol ácido al 50%
6. lavar con agua destilada
7. hematoxilina, 10 min
8. azulidificar con, por ejemplo, carbonato delitio
9. deshidratar, aclarar y montar preparaciones
microorganismos ácido-alcohol resistentes
* Mycobacterium: fuertemente ácido-alcohol resistentes.[1]
* Nocardia y Actinomices:débilmente ácido-alcohol resistentes.[2]
* Parásitos coccídeos (Cryptosporidium) de muestras [fecales].[
Tincion de giemsa
Fundamento
Estos organismos adquieren una coloración diferencial y...
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