Tincion de ziehl neelsen

Tinción de Ziehl Neelsen

a) Filtre la fucsina fenicada antes de usarla.

b) Cubra la superficie del extendido con fucsina.

c) Pase la llama del mechero (o torunda empapada en alcohol) pordebajo de la lámina, hasta que se produzca la emisión de vapores blanquecinos. Deje de calentar y repita el procedimiento dos veces más. La emisión de los vapores blanquecinos debe lograrse tresveces en 5 minutos, que es el tiempo adecuado de contacto entre el extendido y el colorante. La fucsina no debe hervir sobre la lámina, si disminuye por evaporación o derrame, hay que reponerla.

d)Elimine la fucsina con agua del tubo a baja presión, de manera que la película no se desprenda.

e) Gire la lámina para lavar su cara inferior y así eliminar la fucsina ahí depositada.

f) Cubra lasuperficie del extendido con alcohol-ácido al 3% efectuando un movimiento de vaivén y espere 2 minutos de modo que el alcohol-ácido lo decolore y arrastre suavemente la fucsina. Esta operación puederepetirse hasta que sobre el extendido se observe un color rosado.

g) Lave la lámina con agua según se describe en el punto d.

h) Cubra el extendido durante 1 minuto con solución de azul demetileno.

i) Lave ambas caras de la lámina con agua.

j) Seque las láminas a temperatura ambiente, en posición vertical, con el extendido hacia el frente.

k) Revise la identificación de los frotisy rotúlelos de nuevo si se borraron durante la tinción.

Observación microscópica

• La observación microscópica debe determinar la presencia de BAAR (concordancia cualitativa) y establecer sunúmero aproximado por campo microscópico (concordancia cuantitativa).
• Considere campo microscópico útil aquel en el cual se observan elementos celulares de origen bronquial (leucocitos, fibrasmucosas y células ciliadas). Los campos en que no aparezcan dichos elementos no deben contabilizarse en la lectura.
• Observe cada campo microscópico, en superficie y profundidad, con objetivo de...