TINCION GIEMSA

 TINCIÓN GIEMSA
Introducción
Para poder estudiar los frotis sanguíneos se deben colorear. La tinción de Giemsa es un método habitual para el examen defrotis sanguíneos, cortes histológicos y otro tipo de muestras biológicas. Es muy útil para la identificación de riketsias (plasmodium), protozoos entre otras.

Objetivo
El objetivo de la tinción Giemsa eslograr una visión clara de los distintos componentes de la sangre para poder diferenciar cuales son los eritrocitos, linfocitos y plaquetas.

Material y equipo
- Colorante de Giemsa.
- Tampón PBS.- Pipeta Pasteur.
- Cubeta.
- Agua destilada.
- Tubo de ensayo.
- Microscopio


Metodología o Técnica
1. Preparar una extensión sanguínea.

2. Dejamos reposar el portaobjetos con la extensión enel soporte sobre el cristalizador y cubrir la muestra de metanol, durante tres minutos.

3. Eliminamos el exceso de metanol y dejamos secar.

4. Mezclamos en un tubo de ensayo 0.2 ml de azul demetileno según Giemsa y 2 ml de solución tampón pH 7.2.

5. Con la ayuda de una pipeta pasteur cubrir la muestra de esta solución, dejando actuar durante 25 minutos.

6. Eliminamos el exceso y lavamos conagua destilada y posteriormente con tampón pH 7.2, dejamos secar en posición vertical.

7. Una vez seca la tinción echamos una gota de aceite de inmersión y examinamos al microscopio con el objetivo de100x y observar a microscopio.

Observaciones
Los núcleos celulares se tornan violeta intenso. Es frecuente encontrar en el método de Giemsa que la granulación eosinófila no presenta la tonalidadrojo-anaranjada característica sino que presenta una tonalidad pardo rojizo. Esta dificultad puede prevenirse añadiendo una gota de fucsina fenicada por cada 10ml de alcohol metílico utilizado. Lasgranulaciones neutrófilas (lila) y los hematíes (rojo pálido) se tiñen mal; sin embargo, esta coloración permite diferenciar algunas formas de metamielocitos que pueden ser confundidos con los monocitos,...